溶血磷脂酶Ⅰ(LYPLA1)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品：核糖核酸酶A2(RNASE2)卵白蛋白偶聯(lián)物 物種； Homo sapiens (Human，人) 來源； 蛋白偶聯(lián) 性狀：凍干粉 脫氧輔蛋白合酶(DHPS)重組蛋白 物種； Homo sapiens (Human，人) 來源； 原核表達 性狀：凍干粉 甲基轉(zhuǎn)移酶樣蛋白21C(METTL21C)重組蛋白 物種； Rattus norvegicus (

僅供科研實驗產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Lysophospholipase I (LYPLA1)

APT1; LPL1; LYSOPLA; Acyl-Protein Thioesterase 1

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：28.4kDa

實際分子量：28kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Met1~Asp230 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：6.3

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

標(biāo)簽選擇：

親和標(biāo)簽：蛋白重組表達過程中采用親和標(biāo)簽融合表達有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易；另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體和宿主細(xì)胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試，條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白；表達蛋白的分析、純化、檢測

　　誘導(dǎo)表達成功后，表達蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng)，按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

注意事項：  

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復(fù)，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作

相關(guān)產(chǎn)品：

組蛋白脫乙?；?span>5(HDAC5)重組蛋白 物種； Homo sapiens (Human，人) 來源； 原核表達 性狀：凍干粉

脫氧核糖核酸酶Ⅹ(DNASEX)重組蛋白 物種； Homo sapiens (Human，人) 來源； 原核表達 性狀：凍干粉

泛素結(jié)合酶E2C結(jié)合蛋白E2I(UBE2I)重組蛋白 物種； Homo sapiens (Human，人) 來源； 原核表達 性狀：凍干粉

操作步驟 ：

根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?；靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）。

1、樣品前處理：

a)對于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管，然后再裂解。

c)對于組織樣品： 切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。

2、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

前病毒PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; HIV2 Provirus HIV2PCR

七星庫道蟲PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Kudoa septempunctataPCR

葡萄狀穗霉屬通用PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Stachybotrys spp.PCR

平尾毛細(xì)線蟲PCR檢測試劑盒 規(guī)格 50T 英文; Capillaria caudinflataPCR

Tyrosinase 酪酶(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-CD337/NKp30/NCR3 細(xì)胞毒性受體NK-p30抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Orexin-A 增食欲素A/欲激素A 規(guī)格 0.1ml

CD300C Kit Human 人 CD300C ELISA配對抗體 ELISA

TRAF4 英文名稱： 壞死因子受體相關(guān)蛋白4抗體 0.1ml

C1orf98 英文名稱： 1號染色體開放閱讀框98抗體 0.2ml

Anti-CD337/NKp30/NCR3 細(xì)胞毒性受體NK-p30抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

溶血磷脂酶Ⅰ(LYPLA1)重組蛋白牛赤羽病病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Akabane Disease Virus(ADV)RTPCR

牛分支桿菌卡介苗PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mycobacterium bovis BCGPCR

牛呼吸道合胞體病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Bovine Respiartory Syncytial Virus(BRSV)RTPCR

牛莫拉氏菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Moraxella bovisPCR