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醛固酮合酶(ALDOS)重組蛋白

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更新時間:2023-04-03 09:59:14瀏覽次數(shù):386

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 詳見說明書
應用領域 化工 主要用途 科研
英文名稱 Recombinant Aldosterone Synthase (ALDOS) 物種 Homo sapiens (Human,人)
來源 原核表達 應用 Cell culture; Activity Assa
醛固酮合酶(ALDOS)重組蛋白公司正在銷售的產(chǎn)品:氨基?;?(ACY1)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 β-1,3-半乳糖轉(zhuǎn)移酶5(b3GALT5)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 多功能肽酶2(PSMB9)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,人)

詳細介紹

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱:醛固酮合酶(ALDOS)重組蛋白

 英文名稱:Recombinant Aldosterone Synthase (ALDOS)

CPN2; CYP11B; CYP11BL; CYP11B2; P450C18; P450aldo; Steroid 18-hydroxylase; Aldosterone-synthesizing enzyme; Cytochrome P450 Family 11 Subfamily B Polypeptide 2

酶與激酶 代謝通路

物種:Homo   sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::分泌

預測分子量:58.7kDa

實際分子量:59kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:Gly25~Asn503   with N-terminal His Tag

緩沖液成份:PBS,   pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀:凍干粉

純度:>   95%

等電點:9.6

應用:Positive   Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg   5mg

 

樣品要求:

1、待標記樣品需保證90%以上的純度,樣品中不含有干擾標記物結(jié)合的成分,如有特殊成分,請?zhí)崆皹俗⒄f明。

2、待標記樣品最小標記量為1mg,最好是干粉,如果是液體,濃度應大于1mg/ml。

3、抗體IgG樣品中應不含BSA、疊氮鈉成分。

4、大分子蛋白應提供分子量、等電點、緩沖液成分及pH等信息;小分子多肽需提供氨基酸序列;小分子化合物還需提供分子結(jié)構(gòu)式。

5、請?zhí)崆罢f明任何特殊情況。
相關產(chǎn)品:

溶酶體酸脂肪酶A(LIPA)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶3(DCLK3)重組蛋白 物種; Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉 泛素連接酶E3A(UBE3A)重組蛋白 物種; Homo sapiens (Human,人) 來源; 原核表達 性狀:凍干粉

蛋白表達及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

特性

重組蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式,原核細胞表達的重組蛋白為凍干粉狀態(tài),真核細胞表達的重組蛋白為溶液態(tài)保存,這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定,-80條件下可保存數(shù)年。凍干粉在使用前需進行溶解,其中溶解的方法非常關鍵,因為溶解不好會降低蛋白的效用。溶液態(tài)保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程中也需要仔細注意,這些都是用戶在實際應用中經(jīng)常遇到的問題。

(1)原核細胞表達的重組蛋白。Immune tech大腸桿菌表達的凍干重組蛋白,已經(jīng)從包涵體中提純,添加了蛋白保護劑,使用過濾后的無菌水作為復溶劑即可,復溶凍干蛋白100 μg,86 μl的超純水,輕輕搖晃使蛋白溶解,再用移液槍的槍頭輕吹幾下即可溶解,一定不能使用渦旋儀進行快速振蕩或劇烈搖晃。

(2)真核細胞表達的重組蛋白。有活性的蛋白質(zhì)不僅要轉(zhuǎn)錄和翻譯,還要進行翻譯后的加工,使得蛋白質(zhì)的空間折疊方式維持正常,所以重組蛋白必須在真核細胞中進行,如哺乳動物細胞能夠識別和去除基因中的內(nèi)含子,對翻譯后的蛋白質(zhì)進行加工,這樣表達的蛋白質(zhì)具有生物活性。我們用溶液態(tài)來保存,保持了其良好的活性和穩(wěn)定性。

(3)類固醇還原酶1(SRD5α1)重組蛋白的保護劑。在凍干和儲存過程中常用的保護劑或穩(wěn)定劑有糖類,多元醇,聚合物,表面活性劑,某些蛋白和氨基酸等。我們通常加8%(質(zhì)量比體積)的海藻糖作為凍干保護劑。海藻糖可明顯阻止蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)改變以及凍干過程中蛋白質(zhì)的伸展和聚集,也是一種普遍應用的凍干保護劑和填充劑。

刺激隱核蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Cryptocaryon irritansPCR 50T

傳染性胰臟壞死病病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Infectious Pancreatic Necrosis Virus(IPNV)RTPCR 50T

傳染性肌肉壞死病病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Infectious Myonecrosis Virus(IMNV)RTPCR 50T

超廣譜內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; ESBLEscherichia coliβPCR 50T

PIBF(progesterone induced blocking factor) 孕激素誘導阻斷因子(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-CD57 CD57抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh P21/CDKN1A p21蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

TNFRSF19 Kit Mouse 小鼠 TNFRSF19 / TROY ELISA配對抗體 ELISA

TRIB1 英文名稱: G蛋白偶聯(lián)誘導蛋白2受體抗體 0.2ml

COLEC10(liver) 英文名稱: 凝集蛋白家族10抗體() 0.2ml

Anti-CD57 CD57抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

醛固酮合酶(ALDOS)重組蛋白幼禽螺桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Helicobacter pullorumPCR

幼蟲芽胞桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Bacillus larvaePCR

幼蟲芽孢桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Paenibacillus larvaePCR

有輪瑞氏絳蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Raillietina cesticillusPCR

操作步驟:

實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2  100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.51 mL Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70,避免反復凍融。

培養(yǎng)細胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107

0.5 mL1 mL

5×106

0.2 mL0.5 mL

5.置于4搖床平臺上,溫和振蕩15 min

6 14,000rpm,4離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70,避免反復凍融

 


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