通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
我司供應(yīng)的生化檢測(cè)試劑盒,僅供科研使用。
商品介紹:
測(cè)定意義
丙酮酸磷酸雙激酶(pyruvate phosphate dikinase, PPDK, EC 2.7.9.1)是C4途徑和景天科酸代謝途徑的限速酶,催化ATP、丙酮酸和Pi經(jīng)三步反應(yīng)生成磷酸烯醇式丙酮酸。該酶主要存在于C4植物的葉綠體基質(zhì)中,對(duì)光合功能具有重要調(diào)節(jié)作用。
測(cè)定原理
PPDK的逆向反應(yīng)催化磷酸烯醇式丙酮酸、AMP和PPi生成丙酮酸、ATP和Pi,乳酸脫氫酶進(jìn)一步催化丙酮酸和NADH生成乳酸和NAD+,在340nm測(cè)定NADH減少速率,計(jì)算PPDK活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
秦皮 對(duì)照品 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 1g 人可溶性蛋白185(sp185/HER-2/neu/c-erbB-2)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠細(xì)胞色素P450家族成員2E1(CYP2E1)ELISA試劑盒,英文名:CYP2E1 ELISA Kit
苦馬 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;1mg 脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1 PC ELISA Kit 血漿抗凝蛋白C(PC)ELISA試劑盒
直接藍(lán)71(≥50%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:≥50%,BR Direct blue 71 失調(diào)蛋白1(ATXN1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Ataxin 1 (ATXN1)
呫噸(溴太林II) 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 50mg 透明質(zhì)介導(dǎo)細(xì)胞游走受體抗體 OSCP1 ELISA Kit 有機(jī)溶質(zhì)載體伴侶1(OSCP1)ELISA試劑盒
白黎蘆 英文名稱:Resveratrol 保存:-20℃ 規(guī)格:20mg 核苷內(nèi)焦/二酯1抗體
對(duì)酰 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 上皮類癌相關(guān)抗原抗體抗體 ADH/VP/AVP ELISA Kit 人抗利尿/血管加壓素/精(ADH/VP/AVP)ELISA試劑盒
D-核糖(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 D-(-)-Ribose MKN45(人胃細(xì)胞)蘇云金芽孢桿 Bacillus thuringiensis
柯皂(95%) 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 20mg 巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白7抗體 ANX-Ⅳ ELISA Kit 膜聯(lián)蛋白Ⅳ(ANX-Ⅳ)ELISA試劑盒
沒食子兒茶素;Gallocatechin 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 20mg 豚鼠白介素12B(IL12B)ELISA試劑盒,英文名:IL12B ELISA Kit
靈芝G(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ganoderic acid G 中國(guó)臺(tái)灣根霉 Rhizopus formosensis清酒酵母 Saccharomyces sake
levatin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 levatin 中慢生華癸根瘤 Mesorhizobium huakuii糖化酵母 Saccharomyces diastaticus
;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格: 0.1g 14號(hào)染色體開放閱讀框140抗體 VN/CD51+CD61 ELISA Kit 玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA試劑盒
Amberlite?IRA402 強(qiáng)堿型陰離子交換樹脂(氯型) 質(zhì)量規(guī)格:氯型 Amberlite? IRA402 人外周血白細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
丙酮酸磷酸雙激酶(PPDK)測(cè)試盒127-47-9A(醋酯);純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證 規(guī)格: 0.1g
37271-16-2番瀉C 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
磺胺 規(guī)格: 100mg
59-67-6煙 規(guī)格: HPLC≥99%;20mg
14605-22-2?;切苋パ跄?規(guī)格: 20mg
104472-68-6香蒲新;typhaneoside 規(guī)格: 20mg
13739-02-1雙醋瑞因 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
葉下珠 規(guī)格: 2g
73030-71-4白術(shù)內(nèi)酯III;Atractylel 規(guī)格: 20mg
6817-41-0異蓮心 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial