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二胺氧化酶(ABP1)活性蛋白

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更新時間:2023-04-10 16:32:01瀏覽次數(shù):505

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 說明書
應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 用于科研
英文名稱 Active Amiloride Binding Protein 1 (ABP1) 物種 Homo sapiens (Human,人)
來源 原核表達(dá) 應(yīng)用 Cell culture; Activity Assa
二胺氧化酶(ABP1)活性蛋白公司正在銷售的產(chǎn)品:ART4重組食蟹猴 ART4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
Integrin alpha 1 整合素α1抗原 0.5mgIntegrin alpha 1 整合素α1抗原
PIN1重組人 PIN1 / Rotamase Pin1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
AMIGO2 Protein Human 重組人 AMIGO2 蛋白 (

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱:二胺氧化酶(ABP1)活性蛋白

 英文名稱:Active Amiloride Binding Protein 1 (ABP1)

AOC1; DAO; KAO; Histaminase; Kidney amine oxidase; Diamine Oxidase; Amiloride-sensitive amine oxidase; Amine oxidase copper domain-containing protein 1

酶與激酶

物種:Homo   sapiens (Human,人)

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% TrehaloseProclin300.

性狀:凍干粉

純度:>   97%

等電點:6.6

應(yīng)用:Cell   culture; Activity Assays.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg   5mg

 

樣品要求:

1、待標(biāo)記樣品需保證90%以上的純度,樣品中不含有干擾標(biāo)記物結(jié)合的成分,如有特殊成分,請?zhí)崆皹?biāo)注說明。

2、待標(biāo)記樣品最小標(biāo)記量為1mg,最好是干粉,如果是液體,濃度應(yīng)大于1mg/ml

3、抗體IgG樣品中應(yīng)不含BSA、疊氮鈉成分。

4、大分子蛋白應(yīng)提供分子量、等電點、緩沖液成分及pH等信息;小分子多肽需提供氨基酸序列;小分子化合物還需提供分子結(jié)構(gòu)式。

5、請?zhí)崆罢f明任何特殊情況。
相關(guān)產(chǎn)品:

Integrin alpha 1 整合素α1抗原 0.5mgIntegrin alpha 1 整合素α1抗原

AMIGO2 Protein Human 重組人 AMIGO2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ART4重組食蟹猴 ART4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

LAIR1 Protein Mouse 重組小鼠 LAIR1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PIN1重組人 PIN1 / Rotamase Pin1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

特性

重組蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式,原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為凍干粉狀態(tài),真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為溶液態(tài)保存,這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定,-80條件下可保存數(shù)年。凍干粉在使用前需進(jìn)行溶解,其中溶解的方法非常關(guān)鍵,因為溶解不好會降低蛋白的效用。溶液態(tài)保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程中也需要仔細(xì)注意,這些都是用戶在實際應(yīng)用中經(jīng)常遇到的問題。

(1)原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白。Immune tech大腸桿菌表達(dá)的凍干重組蛋白,已經(jīng)從包涵體中提純,添加了蛋白保護(hù)劑,使用過濾后的無菌水作為復(fù)溶劑即可,復(fù)溶凍干蛋白100 μg,86 μl的超純水,輕輕搖晃使蛋白溶解,再用移液槍的槍頭輕吹幾下即可溶解,一定不能使用渦旋儀進(jìn)行快速振蕩或劇烈搖晃。

(2)真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白。有活性的蛋白質(zhì)不僅要轉(zhuǎn)錄和翻譯,還要進(jìn)行翻譯后的加工,使得蛋白質(zhì)的空間折疊方式維持正常,所以重組蛋白必須在真核細(xì)胞中進(jìn)行,如哺乳動物細(xì)胞能夠識別和去除基因中的內(nèi)含子,對翻譯后的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工,這樣表達(dá)的蛋白質(zhì)具有生物活性。我們用溶液態(tài)來保存,保持了其良好的活性和穩(wěn)定性。

(3)類固醇還原酶1(SRD5α1)重組蛋白的保護(hù)劑。在凍干和儲存過程中常用的保護(hù)劑或穩(wěn)定劑有糖類,多元醇,聚合物,表面活性劑,某些蛋白和氨基酸等。我們通常加8%(質(zhì)量比體積)的海藻糖作為凍干保護(hù)劑。海藻糖可明顯阻止蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)改變以及凍干過程中蛋白質(zhì)的伸展和聚集,也是一種普遍應(yīng)用的凍干保護(hù)劑和填充劑。

阿爾萊特葡萄球菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Staphylococcus arlettaePCR 50T

阿馬帕里病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Amapari virus(AMAV)RTPCR 50T

艾美耳球蟲屬通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Eimeria spp.PCR 50T

奧爾帕瓦約病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Allpaahuayo virus(ALLV)RTPCR 50T

mouse Caspase-1 小鼠Caspase-1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-FLG(filaggrin) 絲聚蛋白/中間絲蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rabbit IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.3ml

AlphaNAG (Human AlphaN-acetylglucosaminidase) ELISA Kit 人αN已?;咸擒彰?span> 96T

Syntrophin-3 英文名稱: 互養(yǎng)蛋白3抗體 0.1ml

CCDC21 英文名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白21抗體 0.2ml

Anti-FLG(filaggrin) 絲聚蛋白/中間絲蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

二胺氧化酶(ABP1)活性蛋白即森林腦炎病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Forest Encephalitis Virus(SFV)RTPCR

即蜱傳腦炎病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Tickborne Encephalitis Virus(TBEV,SFV)RTPCR

即雞包涵體肝炎病毒病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Inclusion Body Hepatitis Virus(IBHV,FAVA)PCR

即腸道病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Enteric Virus72(EV72,HAV)72RTPCR

操作步驟:

實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2  100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.51 mL Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70,避免反復(fù)凍融。

培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107

0.5 mL1 mL

5×106

0.2 mL0.5 mL

5.置于4搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6 14,000rpm4離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70,避免反復(fù)凍融

 


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