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產(chǎn)品名稱(chēng)：Hepa 1-6(小鼠肝癌細(xì)胞)

規(guī)格：5×106cells

貨號(hào)：YS-02X9614

產(chǎn)品分類(lèi):細(xì)胞系

儲(chǔ)存條件2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件冰袋冷藏運(yùn)輸

注意事項(xiàng)

1、使用產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作，避免污染。

2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。

3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。

4、所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。

5、本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。

 

實(shí)驗(yàn)材料：

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶

2. 100ml滅菌燒杯2個(gè)； 人皮膚成纖維細(xì)胞,CCC-HSF-1細(xì)胞

3、50ml離心筒2個(gè)

4、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè)

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊；

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；

8、酒精燈1臺(tái)；

細(xì)胞復(fù)蘇步驟：

1：水浴鍋預(yù)熱至37℃?zhèn)溆?/span>

2：準(zhǔn)備15mL離心管，并向其中加入適量培養(yǎng)基待用

3：將細(xì)胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴鍋

4：用力搖晃凍存管，使其在1分鐘內(nèi)融化

5：用紙巾擦拭水漬，轉(zhuǎn)移至生物安全柜。用移液槍吸取細(xì)胞懸液，緩慢滴加到步驟2中準(zhǔn)備好的離心管

6：1200rpm離心3分鐘

7：棄上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，接種至新的無(wú)菌培養(yǎng)器皿中

Phospho-NMDAR1(Ser896)  磷化谷氨受體1抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-Tuberin/TSC2(Ser1420)  磷化結(jié)節(jié)性硬化抗體 規(guī)格: 0.1ml

IL-28A/IFNL2  白細(xì)胞介28A抗體 規(guī)格: 0.2ml

ECT2  上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化2抗體 規(guī)格: 0.1ml

C-Met/Met/HGFR  肝細(xì)胞生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

Desmocollin 1  橋粒糖1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Goat Anti-rat IgG  羊抗大鼠IgG 規(guī)格: 1mg

PRRSV M protein  豬藍(lán)耳病病毒M抗體 1ml

LI-cadherin  肝腸鈣粘連抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-human IgM/APC  APC標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml

PKC epsilon  激C抗體 規(guī)格: 0.1ml

C20orf194  20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框194抗體 規(guī)格: 0.2mlCAPG2/NCAPG2  染色體相關(guān)2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Hepa 1-6(小鼠肝癌細(xì)胞)83-86-3植 規(guī)格： HPLC≥94%,20mg/支

刺梨葉 規(guī)格： 1g

桃枝 規(guī)格： 0.5g

110011-77-38-去乙?；釣?8-deacetyl 規(guī)格： 20mg

535-83-1 規(guī)格： 20mg

通 規(guī)格： 2g

140147-77-9朝藿定A1;Epimedin A1 規(guī)格： 20mg

16830-15-2積雪草 規(guī)格： 20mg

23180-57-6芍藥 規(guī)格： 20mg

三七 規(guī)格： 20mg

細(xì)胞培養(yǎng)方法：

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。