詳細介紹
非洲爪蟾腎細胞系從表觀正常的成年雌性可卡犬中建立了細胞株MDCK (ATCC CCL-34),從中克隆建立了狗上皮樣細胞株Super Tube。 當維持高細胞濃度時,Super tube形成大量的小管(據(jù)報道,24孔板的每孔鋪7x105細胞,3天內(nèi)就能形成小管)。 要形成小管,細胞需要每天兩次換液以提供足夠養(yǎng)分。 與原始細胞株相比,Super Tube的c-AMP的檢測水平低得多,在forskolin刺激下讀出的腺苷環(huán)化酶水平也低;它的跨上皮抗性也比Super Dome (ATCC CRL- 2286) 和 MDCK都低。
規(guī)格:5×105cells/瓶
培養(yǎng)條件:37℃,5% CO2,PH值7.2~7.4,無菌恒溫培養(yǎng)。
細胞數(shù)量:1× 106個
細胞傳代:1:4~1:6傳代;每周換液2~3次
細胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細胞檢測:細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
培養(yǎng)條件:DMEM(高糖) +10% FBS;37℃,5% CO2
傳代方法:建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件:90%FBS+10%DMSO
細胞凍存:液氮凍存?????
T25瓶細胞處理方法
收到非洲爪蟾腎細胞系后,檢查外包裝是否完整,細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時聯(lián)系。并進行以下操作:
1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3. 預(yù)熱*培養(yǎng)基(含1%雙抗)。
4. 顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。
5. ①若細胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上,進行傳代。
②若細胞密度較大,達到80%以上,將細胞傳代培養(yǎng)。
注:
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基。由于運輸過程中的問題,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,這時請在拍照后將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基。(這里是針對原來*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,如果原來FBS濃度是20%,可以增加到25%FBS濃度) 收到細胞后如細胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問題,請當天反饋并提供圖片,且保存前三天照片以便分析。7天內(nèi)反饋,細胞本身問題免費重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實際情況酌情處理;7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,不予免費售后。
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