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家貓肺成纖維細(xì)胞系

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  • 所在地 上海市

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更新時(shí)間:2024-11-08 14:29:21瀏覽次數(shù):228

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 一周 規(guī)格 5×105cells/瓶
家貓肺成纖維細(xì)胞系從一只表觀正常的成年牛腎臟建立了MDBK細(xì)胞株。1973年這株MDBK細(xì)胞被牛病毒性痢疾病毒(BVDV)感染。 1982年發(fā)現(xiàn)了一株未被BVDV感染的MDBK細(xì)胞株。 這株細(xì)胞初來自ATCC 1967年7月第96代的凍存管。 這株MDBK細(xì)胞的后代經(jīng)NVSL檢測(cè),未發(fā)現(xiàn)被任何病毒污染的證據(jù)。 198

詳細(xì)介紹

家貓肺成纖維細(xì)胞系1957年2月18日,S.H. Madin和N.B. Darby從一只表觀正常的成年牛腎臟建立了MDBK細(xì)胞株。1973年這株MDBK細(xì)胞被牛病毒性痢疾病毒(BVDV)感染。 1982年發(fā)現(xiàn)了一株未被BVDV感染的MDBK細(xì)胞株。 這株細(xì)胞最初來自ATCC 1967年7月第96代的凍存管。 這株MDBK細(xì)胞的后代經(jīng)NVSL檢測(cè),未發(fā)現(xiàn)被任何病毒污染的證據(jù)。 1982年8月,R.A. Van Deusen將其提供給ATCC時(shí),已傳代至第110代。 這株細(xì)胞未被BVDV感染。 

規(guī)格:5×105cells/瓶
培養(yǎng)條件:37℃,5% CO2,PH值7.2~7.4,無菌恒溫培養(yǎng)。
細(xì)胞數(shù)量:1× 106個(gè)
細(xì)胞傳代:1:4~1:6傳代;每周換液2~3次
細(xì)胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞檢測(cè):細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
培養(yǎng)條件:DMEM(高糖) +10% FBS;37℃,5% CO2
傳代方法:建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件:90%FBS+10%DMSO
細(xì)胞凍存:液氮凍存?????

T25瓶細(xì)胞處理方法

收到家貓肺成纖維細(xì)胞系后,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作:

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱*培養(yǎng)基(含1%雙抗)。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。

5. ①若細(xì)胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,進(jìn)行傳代。

②若細(xì)胞密度較大,達(dá)到80%以上,將細(xì)胞傳代培養(yǎng)。

注:

培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基。由于運(yùn)輸過程中的問題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,這時(shí)請(qǐng)?jiān)谂恼蘸髮腋〉募?xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基。(這里是針對(duì)原來*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,如果原來FBS濃度是20%,可以增加到25%FBS濃度)   收到細(xì)胞后如細(xì)胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問題,請(qǐng)當(dāng)天反饋并提供圖片,且保存前三天照片以便分析。7天內(nèi)反饋,細(xì)胞本身問題免費(fèi)重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實(shí)際情況酌情處理;7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,不予免費(fèi)售后。

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