Hypoxyprobe?-1 RED PE試劑盒組件詳細(xì)描述

1) Hypoxyprobe?-1是一種取代的2-硝基咪唑，其化學(xué)名稱為鹽酸皮莫尼達(dá)唑，分子量為290.8；水溶性為400毫摩爾（116 mg/ml）；在324 nm波長下具有紫外線吸收（在0.9%生理鹽水中消光系數(shù)為7020）。游離堿基皮莫尼達(dá)唑的分子量為254.3，pKa為8.7，八醇-水分配系數(shù)為8.5。有關(guān)Hypoxyprobe?-1的作用機(jī)制。固體Hypoxyprobe?-1在室溫下低光照條件下儲(chǔ)存了兩年，并在4℃的0.9%生理鹽水（100 g/liter）中儲(chǔ)存了4.5年，未檢測(cè)到降解（UV和HPLC分析）。皮莫尼達(dá)唑在缺氧細(xì)胞中被還原激活，并與蛋白質(zhì)、肽和氨基酸中的巰基（硫氫基）形成穩(wěn)定的加合物。RED PE染料-MAb1與這些加合物結(jié)合，從而允許通過免疫化學(xué)方法進(jìn)行檢測(cè)。

2) RED PE染料-MAb1是一種與大鼠IgG1單克隆抗體（MAb克隆4.3.11.3）偶聯(lián)的染料，濃度為0.5 mg/ml，含有1% BSA和0.09%疊氮鈉作為穩(wěn)定劑。感興趣的組織可以通過在冷凍固定切片或甲醛固定石蠟包埋切片上的免疫組化進(jìn)行研究，或者通過組織解離后的流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行研究。  

注意：RED PE染料-MAb1結(jié)合皮莫尼達(dá)唑的蛋白質(zhì)、肽和氨基酸加合物，但在免疫組化過程中，組織處理會(huì)洗去肽和氨基酸加合物，因此免疫組化缺氧檢測(cè)依賴于缺氧組織中皮莫尼達(dá)唑的蛋白質(zhì)加合物。

作為Hypoxyprobe在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Hypoxyprobe熱銷產(chǎn)品【缺氧探針】RedPE。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

應(yīng)用

用于細(xì)胞和組織缺氧的免疫化學(xué)檢測(cè)，包括免疫熒光、免疫過氧化酶或流式細(xì)胞術(shù)。該Hypoxyprobe?-1 RED PE試劑盒在福爾馬林固定的石蠟包埋大鼠腫瘤組織中提供強(qiáng)烈的免疫染色效果，背景極低。

數(shù)量

a. Hypoxyprobe?-1 RED PE試劑盒包含100 mg、200 mg或1000 mg的Hypoxyprobe?-1（匹莫噻唑鹽酸鹽）。通常，動(dòng)物研究中使用的劑量為60 mg/kg體重。

b. 一個(gè)小瓶（100 mg和200 mg試劑盒）或兩個(gè)小瓶（1000 mg試劑盒）含有200 ?L稀釋的RED PE染料偶聯(lián)的IgG1大鼠單克隆抗匹莫噻唑抗體（克隆11.23.22.R）。每個(gè)小瓶包含200微升的0.50 mg/ml RED PE染料-MAb1溶液，PBS中含有1% BSA和0.09%疊D化鈉。RED PE染料-MAb1的最佳稀釋度由研究人員確定，但發(fā)現(xiàn)1:50-100的稀釋度在大鼠腫瘤組織中提供強(qiáng)烈的免疫熒光染色。RED PE染料-MAb1專為免疫熒光設(shè)計(jì)，可在熒光顯微鏡下或流式細(xì)胞術(shù)和Western Blot應(yīng)用中可視化。免疫熒光中抗體的稀釋度通常低于免疫過氧化酶檢測(cè)系統(tǒng)中使用的稀釋度。

不提供

用于免疫組織化學(xué)分析的標(biāo)準(zhǔn)試劑。

儲(chǔ)存

a. 將Hypoxyprobe?-1固體在黑暗中室溫儲(chǔ)存（也可在2-8°C的黑暗中儲(chǔ)存）。

b. 將RED PE染料-MAb在2-8°C的黑暗中儲(chǔ)存。請(qǐng)勿冷凍。

檢測(cè)說明

1. 正常或腫瘤組織缺氧的研究開始于以60 mg/kg體重劑量靜脈輸注、腹腔注射或口服給藥Hypoxyprobe?-1（鹽酸皮莫尼達(dá)唑）溶液。對(duì)于25克的小鼠，相當(dāng)于1.5 mg/只。對(duì)小鼠使用高達(dá)400 mg/kg的劑量未檢測(cè)到毒性或組織缺氧變化，但60 mg/kg可以在低成本下獲得良好的免疫染色。Hypoxyprobe?-1在生理鹽水中的溶解度為116 mg/ml，因此可以使用非常小的體積來給藥。注射或口服后，Hypoxyprobe?-1會(huì)分布到所有組織，包括大腦，但只有在氧氣濃度低于14微摩爾（相當(dāng)于37℃下pO2 = 10 mmHg）的細(xì)胞中與含巰基的蛋白質(zhì)形成加合物。除了腫瘤，肝臟、腎臟和皮膚等正常組織中也存在pO2 = 10 mmHg及以下的細(xì)胞，這些正常組織也會(huì)結(jié)合Hypoxyprobe?-1。Hypoxyprobe?-1在小鼠體內(nèi)的血漿半衰期約為25分鐘。相比之下，老鼠的血漿半衰期為45分鐘，狗為90分鐘，人類為300分鐘。對(duì)感興趣的大鼠組織可在Hypoxyprobe?-1給藥后15至90分鐘內(nèi)收集。在收獲時(shí)，組織中殘留的Hypoxyprobe?-1將在組織缺氧時(shí)結(jié)合，但與組織在15至90分鐘實(shí)驗(yàn)期間暴露的Hypoxyprobe?-1的數(shù)量相比，殘留量非常小，因此任何由于殘留Hypoxyprobe?-1導(dǎo)致的非特異性結(jié)合是不可檢測(cè)的。

除了動(dòng)物研究，Hypoxyprobe?試劑盒還可以用于細(xì)胞培養(yǎng)。通常，細(xì)胞懸液在100至200微摩爾的Hypoxyprobe?-1存在下，在缺氧條件下孵育1至2小時(shí)。細(xì)胞通過細(xì)胞旋轉(zhuǎn)收集，固定并用RED PE MAb-1免疫染色。

Hypoxyprobe, Inc.（缺氧探針公司）專注于研發(fā)非侵略性的缺氧標(biāo)志物（Hypoxia maker）和缺氧依賴性的細(xì)胞因子，所有產(chǎn)品皆基于Pimonidazole核心結(jié)構(gòu)來開發(fā)。 使用Pimonidazole HCl作為缺氧標(biāo)記物，廣泛用在狗、大小鼠。缺氧探針試劑盒核心組分為：缺氧探針（Pimonidazole 或CCI-103F）和缺氧探針的抗體。不同試劑盒中的探針和抗體標(biāo)記不同（可應(yīng)用于免疫熒光（IF），免疫組化（IHC），WB或流式細(xì)胞分析（FC））

艾美捷科技是Hypoxyprobe的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。

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