急性期蛋白是感染、炎癥后濃度增加的血漿蛋白或創(chuàng)傷。Tillet和Frances在人類中發(fā)現(xiàn)了第一個被識別的急性期蛋白19301年觸珠蛋白（Hp）是一種異質(zhì)性血漿蛋白，主要由肝臟合成。這個觸珠蛋白單體由兩條重鏈β鏈（40kD）和兩條輕鏈α鏈組成，α1（9kD）和α2（16kD），它們是連接的二硫鍵。三種主要的觸珠蛋白類型是：；Hp1-1是單體（98kD），Hp1-2在約200kD處是聚合物，Hp2-2在約400kD處是聚合物。這個急性組織損傷后24至48小時內(nèi)，血清水平迅速上升，也迅速下降一旦刺激被移除。事實上，溶血性貧血患者的Hp水平會降低。Hp具有很高的親和力血紅蛋白（Hb）及其功能似乎是防止尿液中Hb的流失，從而導(dǎo)致流失鐵。過去幾年的研究表明，血漿或血清中Hp的定量可以為疾病的檢測、預(yù)后和監(jiān)測提供有價值的診斷信息，不僅限于人類，但伴侶動物和農(nóng)場畜群也是如此。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品Haptoglobin(人)ELISA(96孔)。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Haptoglobin(人)ELISA(96孔)檢測原理：

如圖1所示，在這種測定中，樣品中的觸珠蛋白與已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗觸珠蛋白抗體發(fā)生反應(yīng)。通過洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的抗觸珠蛋白抗體。這些酶標(biāo)記的抗體與之前結(jié)合的觸珠蛋白形成復(fù)合物。經(jīng)過另一次洗滌步驟后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來測定與免疫吸附劑結(jié)合的酶。結(jié)合的酶量與測試樣品中觸珠蛋白的濃度成正比；因此，450納米處的吸光度是測試樣品中觸珠蛋白濃度的量度。測試樣品中觸珠蛋白的量可以從標(biāo)準曲線中插值得出，并根據(jù)樣品稀釋進行校正。

試劑（足夠進行96次測定的數(shù)量）

稀釋液濃縮液（測定緩沖液）

一瓶含有50毫升5倍濃縮稀釋液測定緩沖液。

洗滌液濃縮液

一瓶含有50毫升20倍濃縮洗滌液。

酶-抗體結(jié)合物100倍

一瓶含有150微升與辣根過氧化物酶結(jié)合的親和純化抗人觸珠蛋白抗體，在穩(wěn)定緩沖液中。

顯色底物溶液

一瓶含有12毫升3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）和過氧化氫的檸檬酸緩沖液，pH值為3.3。

終止液

一瓶含有12毫升0.3 M硫酸。

警告：避免與皮膚接觸。

抗人觸珠蛋白ELISA微孔板

十二個可移動的八（8）孔微孔條置于微孔板支架框架中。每個孔都涂有親和純化抗人觸珠蛋白。

人觸珠蛋白校準液

一瓶含有凍干的人觸珠蛋白校準液。

試劑準備

稀釋液濃縮液

提供的稀釋液為5倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮液，4份dH2O）稀釋1:5。

洗滌液濃縮液

提供的洗滌液為20倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮液，19份dH2O）稀釋1:20。濃縮液在儲存溫度較低時出現(xiàn)結(jié)晶并不罕見。稀釋前將濃縮液加熱至30-35°C可以溶解晶體。

酶-抗體結(jié)合物

通過向每個微孔板測試條添加10微升酶-抗體結(jié)合物至990微升1X稀釋液中，計算每個微孔板測試條所需的工作結(jié)合物溶液量。均勻但輕柔地混合。避免起泡。

顯色底物溶液

按提供狀態(tài)直接使用。

終止液

按提供狀態(tài)直接使用。

抗人觸珠蛋白ELISA微孔板

按提供狀態(tài)直接使用。揭開微孔板袋，從袋中取出板。取出在測定中不會使用的所有條和孔，放回袋中并重新密封，同時放入干燥劑。

人觸珠蛋白校準液

向人觸珠蛋白校準液中加入1.0毫升蒸餾或去離子水，輕輕混合直至溶解。校準液現(xiàn)在濃度為11.33微克/毫升（如果打算將來使用，重組校準液應(yīng)分裝并冷凍）。人觸珠蛋白標(biāo)準品需要在使用前立即準備。每步之間混合均勻。避免起泡。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細胞因子與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

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