ICA（胰島細(xì)胞抗體）ELISA是一種定性ELISA檢測，用于檢測針對胰島細(xì)胞抗原的循環(huán)IgG抗體。此試劑盒僅供研究使用，不用于診斷程序。

依賴胰島素的糖尿?。↖DDM）或1型糖尿病是一種使人衰弱的慢性疾病，它損害了關(guān)鍵激素胰島素的產(chǎn)生和分泌，并改變了血糖代謝。胰島素是由胰島細(xì)胞或蘭格漢斯島（1）合成和分泌的。在IDDM中，胰島素合成的中斷是由自身抗體對胰島細(xì)胞的免疫破壞引起的（2-4）。這種異常（自身免疫）可能是遺傳的和/或由接觸有毒化學(xué)物質(zhì)、病毒感染以及各種形式的壓力觸發(fā)的（5）。研究表明，IDDM有一個(gè)特征性的無癥狀糖尿病前期，可能持續(xù)數(shù)年。在這段時(shí)間里，研究表明受影響的個(gè)體在對靜脈/k服葡萄糖挑戰(zhàn)的反應(yīng)中表現(xiàn)出胰島素早期釋放的減少。在大多數(shù)情況下，這些個(gè)體攜帶循環(huán)的胰島細(xì)胞自身抗體（ICA）和/或胰島素自身抗體（IAA）。研究表明，ICA可以在IDDM發(fā)病前8年就被檢測到（6），因此可能作為疾病的早期指標(biāo)或?qū)膊〉囊赘行?。ICA陽性的個(gè)體可能會(huì)顯示出胰島細(xì)胞功能的逐漸喪失，這表明早期胰島素釋放的中斷。研究表明，當(dāng)這種早期胰島素釋放w全停止時(shí)，明顯的IDDM就會(huì)發(fā)展（6）。在最近發(fā)病的IDDM個(gè)體中，70%存在胰島細(xì)胞自身抗體（13,14），而對照非糖尿病人群的這一比例為0.1-0.5%（11,15）。ICA也在IDDM個(gè)體的一級(jí)親屬中被檢測到。這些個(gè)體構(gòu)成了人類人群中有高風(fēng)險(xiǎn)發(fā)展IDDM的群體。一些研究報(bào)告稱，IDDM個(gè)體的ICA陽性一級(jí)親屬隨后發(fā)展為糖尿?。?6-19）。其他研究也表明，血清ICA和IAA的存在是發(fā)展IDDM可能性增加的指標(biāo)（3,6-12）。因此，ICA的血清學(xué)檢測可能是研究IDDM發(fā)展的有力工具。這些自身抗體作為IDDM標(biāo)志物的研究意義也體現(xiàn)在它們存在于最終發(fā)展為IDDM的非糖尿病個(gè)體中。Riley等人最近報(bào)告稱，在2型糖尿病患者中測定ICA可以識(shí)別IDDM的發(fā)病前并預(yù)測對胰島素治療的需求（20）。研究表明，攜帶血清ICA的2型糖尿病患者可能會(huì)惡化為胰島素依賴。目前，血清ICA是通過間接免疫熒光和組織化學(xué)方法測定的，這些方法使用冷凍未固定的人類/靈長類動(dòng)物或嚙齒動(dòng)物胰腺切片作為底物。盡管自1974年最初描述以來，人們嘗試了各種改進(jìn)和修改這一程序（22,23），但間接免疫熒光/組織化學(xué)技術(shù)存在固有的方法學(xué)問題。技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化證明非常困難。這種“冷凍切片"技術(shù)的可靠性受到從一個(gè)胰腺到另一個(gè)胰腺的變化、不可避免地需要未固定的胰腺組織以及適當(dāng)組織不常見的可用性等因素的影響。ICA（胰島細(xì)胞抗體）ELISA使用一組純化的胰島細(xì)胞特異性抗原在微孔板ELISA程序中檢測血清ICA的存在。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品胰島細(xì)胞Ab (ICA) EIA(96孔)。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

胰島細(xì)胞Ab (ICA) EIA(96孔)檢測原理：

一種純化的胰臟抗原混合物被固定在微孔板上。在孵育期間，血清樣本中的抗體被允許在室溫下與微孔板上的抗原分子反應(yīng)。洗滌掉多余的/未結(jié)合的血清物質(zhì)后，添加一種酶（堿性磷酸酶）標(biāo)記的山羊抗體，該抗體特異性結(jié)合人類IgG，加入到抗原-抗體復(fù)合物中。經(jīng)過再次c底洗滌后，加入底物（PNPP），并使用分光光度計(jì)測量產(chǎn)生的色素。色素的強(qiáng)度與樣本中ICA的濃度成正比。ICA陽性對照作為內(nèi)部質(zhì)量控制，確保結(jié)果的有效性。

試劑盒中提供的所有試劑僅供研究使用。

1. 潛在生物危害材料

校準(zhǔn)品和對照品的基質(zhì)是人血清。所用的人血清在使用FDA許可的試劑進(jìn)行測試時(shí)，被發(fā)現(xiàn)對HBsAg、抗HIV 1/2和抗HCV無反應(yīng)。由于沒有任何測試方法可以w全保證HIV、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒或其他傳染性病原體的缺失，因此應(yīng)將這些試劑視為潛在的傳染性物質(zhì)進(jìn)行處理。

2. d氮化鈉

一些試劑含有作為防腐劑的d氮化鈉。d氮化鈉可能與管道中的鉛、銅或黃銅發(fā)生反應(yīng)，形成爆炸性的金屬疊氮化物。在處理這些材料時(shí)，總是要用大量的水沖洗，以防止疊氮化物積累。

3. 終止液

終止液由1N氫氧化鈉組成。這是一種強(qiáng)堿，應(yīng)謹(jǐn)慎處理。它可能導(dǎo)致灼傷，處理時(shí)應(yīng)戴手套。戴上眼部保護(hù)和適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)f。避免吸入。在用紙巾吸收之前，用水稀釋泄漏物。

4. 底物溶液

底物溶液由對硝基苯磷酸酯（PNPP）組成，這是一種在本ELISA中使用的非蛋白色素原底物。偶爾底物可能會(huì)呈現(xiàn)黃色。這種顏色不會(huì)干擾檢測結(jié)果。

預(yù)防措施

1. 不要冷凍測試試劑，始終將所有試劑盒組分存放在2-8°C的環(huán)境中。

2. 每次進(jìn)行檢測時(shí)，都必須運(yùn)行陽性和陰性對照。

3. 只使用清晰的血清作為測試樣本。測試樣本不應(yīng)有嚴(yán)重的渾濁、溶血或微生物污染。

4. 所有樣本都應(yīng)進(jìn)行雙重分析。

5. 不要混合不同批次的試劑。

6. 不要使用過期的試劑。

7. 不要讓試劑在室溫下長時(shí)間放置。

8. 不要讓底物溶液暴露在光線下。

9. 為了獲得可重復(fù)和準(zhǔn)確的結(jié)果，需要精確的移液技術(shù)。

文獻(xiàn)參考：

1. Orci, L., J. Vassali, and A. Parrelet (1988). The insulin factory. Sci. Amer., 261:85-94.

2. Eisenbarth, G.S. (1985). Type I diabetes: A ch ronic autoimmune disease. New Engl. J.Med., 314:1360-1368.

3. Eisenbarth, G.S., J. Connelly, and J.S. Soeldner (1987). The natural hist ory of Type Idiabetes. Diabet./Metab. Rev., 3:873-891.

4. Etzioni, A. (1987). Immunological concepts i n insulin-dependent (Type I) DiabetesMellitus Immunol Res., 6:224-251.

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

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