脂質(zhì)包被珠被設(shè)計(jì)用于蛋白質(zhì)下拉實(shí)驗(yàn)。用于檢測(cè)純化蛋白質(zhì)、細(xì)胞裂解物中蛋白質(zhì)的脂質(zhì)結(jié)合，或放射性標(biāo)記的體外翻譯產(chǎn)物的結(jié)合。

S1P珠由瓊脂糖組成，每毫升珠含有10納摩爾的結(jié)合鞘氨醇1-磷酸（S1P），足以進(jìn)行幾次蛋白質(zhì)結(jié)合實(shí)驗(yàn)。每1mL S1P珠粒包括少量對(duì)照珠粒。更多數(shù)量的控制珠也可供購(gòu)買(mǎi)。

作為Biogradetech-d家代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Biogradetech熱銷(xiāo)產(chǎn)品 Sphingosine 1-phosphate (S1P) 瓊脂糖珠。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Sphingosine 1-phosphate (S1P) 是一種重要的生物活性鞘脂，參與多種細(xì)胞過(guò)程。

S1P 瓊脂糖珠的原理與特點(diǎn)

S1P 瓊脂糖珠利用瓊脂糖珠的高吸附性和特異性，通過(guò)特定的化學(xué)或生物學(xué)方法將S1P固定于珠上。這種設(shè)計(jì)允許研究人員通過(guò)簡(jiǎn)單的操作步驟，從復(fù)雜的生物樣品中捕獲和富集S1P。

S1P 瓊脂糖珠的應(yīng)用

S1P 瓊脂糖珠在S1P的檢測(cè)和分析中具有廣泛的應(yīng)用潛力。它可以用于：

從細(xì)胞培養(yǎng)上清或生物體液中提取S1P。

研究S1P與其受體的相互作用。

作為藥物篩選和開(kāi)發(fā)的工具，評(píng)估S1P受體激動(dòng)劑或拮抗劑的活性。

S1P 瓊脂糖珠操作流程

使用S1P 瓊脂糖珠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)通常包括以下步驟：

樣品準(zhǔn)備：收集并處理細(xì)胞培養(yǎng)上清或生物體液。

結(jié)合S1P：將樣品與S1P 瓊脂糖珠混合，允許S1P與珠結(jié)合。

洗滌和分離：去除未結(jié)合的物質(zhì)，分離出結(jié)合S1P的珠。

檢測(cè)和分析：利用質(zhì)譜、ELISA或其他檢測(cè)方法分析結(jié)合的S1P。

脂質(zhì)珠^TM測(cè)定注意事項(xiàng)：

脂質(zhì)包被珠有1 mL和0.1 mL兩種規(guī)格，以1X PBS緩沖液中的50%漿液形式提供。

訂購(gòu)1 mL的產(chǎn)品會(huì)附帶200 µL的對(duì)照珠。對(duì)照珠也可單獨(dú)購(gòu)買(mǎi)，建議使用它們進(jìn)行分析。

儲(chǔ)存在2-8°C。產(chǎn)品對(duì)溫度和光線敏感，請(qǐng)勿冷凍。

以1,000 x g或更低的速度離心珠。不要高速離心珠，因?yàn)檫@可能會(huì)壓碎珠。

每1 mL珠中有總計(jì)10毫摩爾的結(jié)合脂質(zhì)。

珠的直徑范圍在45-165微米之間。

對(duì)每種蛋白質(zhì)使用50-100 µL的50%漿液脂質(zhì)包被珠和對(duì)照珠。

了解陽(yáng)性對(duì)照蛋白列表。

脂質(zhì)珠^TM - 蛋白質(zhì)拉下協(xié)議：

我們提供以下協(xié)議作為指南，并強(qiáng)烈鼓勵(lì)研究人員查閱科學(xué)文獻(xiàn)并進(jìn)行優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，以確定對(duì)其感興趣的蛋白質(zhì)最有利的條件。

充分混合珠（不要渦旋）。將50-100 µL的50%珠漿液轉(zhuǎn)移到0.5-1.5 mL的管中。

以1,000 x g或更低的速度離心珠以沉淀。小心移除上清液，避免丟失珠。

用洗滌緩沖液的10倍過(guò)量洗滌珠。輕輕混合，孵育1-2分鐘。重復(fù)洗滌步驟兩次。

小心移除洗滌上清液，并將珠在含有您的蛋白質(zhì)的結(jié)合緩沖液中重新懸浮。 a. 對(duì)于純化的蛋白質(zhì)，使用1-10 µg的蛋白質(zhì)，用足夠的結(jié)合緩沖液稀釋形成50%脂質(zhì)珠漿液。 b. 對(duì)于細(xì)胞裂解物、提取物、亞細(xì)胞組分：使用大約1 mg的總蛋白質(zhì)對(duì)1 mL結(jié)合緩沖液。將整個(gè)1 mL準(zhǔn)備好的樣品加入到您洗滌過(guò)的珠中。

將蛋白質(zhì)-珠溶液孵育1-3小時(shí)。孵育可以在室溫或4°C下進(jìn)行，取決于您蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。需要連續(xù)運(yùn)動(dòng)以保持珠懸浮。

沉淀珠并小心移除上清液。如果需要，上清液可以用來(lái)監(jiān)測(cè)未結(jié)合的蛋白質(zhì)。

用洗滌緩沖液的10倍過(guò)量洗滌珠。輕輕混合，孵育1-2分鐘。重復(fù)洗滌步驟五次。如果您選擇在結(jié)合緩沖液中使用牛血清白蛋白（BSA），請(qǐng)確保在進(jìn)入下一步之前將其c底洗出。

在最后一次洗滌后，通過(guò)向珠中加入等體積的2X Laemmli樣品緩沖液（或類(lèi)似物）并加熱至70°C 10分鐘來(lái)洗脫結(jié)合的蛋白質(zhì)。

加熱后，沉淀珠并移除上清液。將上清液儲(chǔ)存在4°C下，直到分析。丟棄珠。

蛋白質(zhì)可以通過(guò)SDS-PAGE分離，并通過(guò)凝膠的Coomassie藍(lán)染色、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移和免疫印跡檢測(cè)感興趣的蛋白質(zhì)，或進(jìn)行自顯影。

文獻(xiàn)參考：

1) N. C. Hait, J. Allegood, et al. (2009) “Regulation of histone acetylation in the nucleus by sphingosine-1-phosphate" Science 325(5945), 1254-7

2) G. M. Strub, M. Paillard, et al. (2011) “Sphingosine-1-phosphate produced by sphingosine kinase 2 in mitochondria interacts with prohibitin 2 to regulate complex IV assembly and respiration" The FASEB Journal 25(2), 600-612 10.1096/fj.10-167502

3) E.-S. Park, S. Choi, et al. (2015) “Tumor Necrosis Factor (TNF) Receptor-associated Factor (TRAF)-interacting Protein (TRIP) Negatively Regulates the TRAF2 Ubiquitin-dependent Pathway by Suppressing the TRAF2-Sphingosine 1-Phosphate (S1P) Interaction" J. Biol. Chem. 290(15), 9660-9673 10.1074/jbc.M114.609685

4) Parham, K. A., et al. (2015). “Sphingosine 1-phosphate is a ligand for peroxisome proliferator-activated receptor-γ that regulates neoangiogenesis." The FASEB Journal 29(9): 3638-3653.

Biogradetech成立于2015年，總部位于美國(guó)加利福尼亞州，早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務(wù)起家，逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線，并將其商業(yè)化銷(xiāo)售，包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。適用于細(xì)胞生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、診斷學(xué)、生物化學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域。

S1P瓊脂糖珠(蛋白標(biāo)準(zhǔn)品)S1P瓊脂糖珠(蛋白標(biāo)準(zhǔn)品)