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該產(chǎn)品的目的是確定測試樣品中因子P的功能。這個(gè)根據(jù)校準(zhǔn)品(人血清)設(shè)置定性確定功能100%功能。
該產(chǎn)品僅供經(jīng)過培訓(xùn)的實(shí)驗(yàn)室人員使用。不得使用結(jié)果用于臨床診斷或患者管理。僅供研究使用。
艾美捷Svar Life Science補(bǔ)體P因子功能檢測試劑盒(#COMPL FPF RUO)內(nèi)容:
一個(gè)帶有微孔板(12x8)的框架,涂有抗因子P單克隆抗體,密封在帶有干燥袋的箔包裝中。
1.5毫升陰性對照(NC),綠色,綠色蓋子。準(zhǔn)備使用。
3.0毫升校準(zhǔn)液,200納克/毫升。準(zhǔn)備使用。
32毫升稀釋液(Dil),紅色。準(zhǔn)備使用。
30毫升洗滌液,30倍濃縮。
凍干激活劑。
15毫升激活劑稀釋液。準(zhǔn)備使用。
3.0毫升抑制劑。準(zhǔn)備使用。
含有針對C3b的HRP標(biāo)記抗體的7.5毫升結(jié)合物,藍(lán)色,棕色瓶。準(zhǔn)備使用。
15毫升底物TMB,棕色瓶。準(zhǔn)備使用。
15毫升終止液(0.5M H2SO4)。準(zhǔn)備使用。
需要但未提供的物料或設(shè)備
帶有450納米和620納米濾光片的微孔板讀取器
軌道搖床(200轉(zhuǎn)/分鐘)
帶有一次性吸頭的精密移液器
96孔板或條的密封膜
96孔板或條的洗滌器
吸水紙
試劑和樣本稀釋用的容器
冰塊或相等的板冷卻設(shè)備
計(jì)時(shí)器
補(bǔ)體P因子功能檢測試劑盒測定原理:
補(bǔ)體因子P功能測定是一種酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA),它結(jié)合了功能性補(bǔ)體活性測定的原理和使用針對沉積的補(bǔ)體蛋白的標(biāo)記抗體。沉積的補(bǔ)體蛋白量與樣本中因子P的功能活性成正比。
一般化驗(yàn)信息:
穩(wěn)定性和儲存:
所有試劑應(yīng)儲存在2-8°C,激活劑除外。在2-8°C儲存時(shí),稀釋后的洗滌液在試劑盒有效期內(nèi)穩(wěn)定。
凍干激活劑應(yīng)儲存在-20°C或更低溫度。重懸后的激活劑可以在-70°C下冷凍并解凍一次。
樣本收集和準(zhǔn)備:
應(yīng)使用無菌靜脈穿刺技術(shù)收集全血樣本,并使用標(biāo)準(zhǔn)程序獲取血清或EDTA血漿。建議每個(gè)樣本至少抽取5毫升全血。離心血樣并將無細(xì)胞血清或血漿轉(zhuǎn)移到干凈的試管中。
離心后的血清或EDTA血漿可保存在4°C。較長時(shí)間儲存時(shí),血清和血漿樣本應(yīng)冷凍在-20°C或更低溫度。建議在分析前不要將測試樣本凍融超過兩次。
每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)確定測試樣本儲存條件的可接受性,因?yàn)檫@可能會(huì)因前處理因素而異。
在進(jìn)行補(bǔ)體P功能測定分析之前,先確定每個(gè)測試樣本中因子P的濃度(見第10節(jié)“測定程序"第5步)。對于這種因子P濃度的測定,可以使用Svar Life Sciences AB的因子P定量測定。
補(bǔ)體P因子功能檢測試劑盒文獻(xiàn)參考:
(1) Blatt, A. Z.; Pathan, S.; Ferreira, V. P. Properdin: A Tightly Regulated Critical Inflammatory Modulator.Immunol Rev 2016, 274 (1), 172–190.
(2) Fearon, D. T.; Austen, K. F. Properdin: Binding to C3b and Stabilization of the C3b-Dependent C3 Convertase. J Exp Med 1975, 142 (4), 856–863.
(3) Chen, J. Y.; Cortes, C.; Ferreira, V. P. Properdin: A Multifaceted Molecule Involved in Inflammation and Diseases. Mol. Immunol. 2018, 102, 58–72.
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