Wieslab®補(bǔ)體系統(tǒng)篩查試劑盒是一種酶免疫測定法，用于定性測定人血清中功能性的經(jīng)典、MBL和替代補(bǔ)體途徑，結(jié)果不得用于臨床診斷或患者管理。

補(bǔ)體系統(tǒng)在慢性、自身免疫和感染性疾病中發(fā)揮著重要作用。補(bǔ)體激活有三條途徑（圖1），即經(jīng)典途徑、替代途徑和最近發(fā)現(xiàn)的MBL途徑。

艾美捷Svar Life Science補(bǔ)體P因子功能檢測試劑盒（#COMPL300）測定原理：

Wieslab®補(bǔ)體測定結(jié)合了補(bǔ)體激活的溶血測定原理和使用針對補(bǔ)體激活產(chǎn)生的新抗原的標(biāo)記抗體。產(chǎn)生的新抗原量與補(bǔ)體途徑的功能活性成正比。微孔板條的孔涂有經(jīng)典途徑、MBL途徑或替代途徑的特定激活劑。待測血清稀釋在含有特定阻斷劑的稀釋液中，以確保僅激活相應(yīng)的途徑。在將稀釋的待測血清孵育于孔中時(shí)，補(bǔ)體通過特定涂層被激活。

然后對孔進(jìn)行洗滌，并使用針對MAC形成期間表達(dá)的新抗原的特定堿性磷酸酶標(biāo)記抗體檢測C5b-9。在進(jìn)一步洗滌后，通過與堿性磷酸酶底物溶液孵育獲得特定抗體的檢測。補(bǔ)體激活的程度與顏色強(qiáng)度相關(guān)，以吸光度（光密度OD）表示。

警告和注意事項(xiàng)：

僅限研究使用。不得用于診斷程序。

試劑盒中用于制備對照的人類血清成分已使用FDA批準(zhǔn)的方法檢測了人類免疫缺陷病毒1&2（HIV 1&2）、丙型肝炎（HCV）以及乙型肝炎表面抗原的存在，并呈陰性。由于沒有檢測方法可以w全保證HIV、HCV、乙型肝炎病毒或其他傳染性病原體的缺失，因此應(yīng)將樣本和基于人類的試劑作為能夠傳播傳染性病原體進(jìn)行處理。

疾病控制和預(yù)防中心和國立衛(wèi)生研究院建議在生物安全等級2下處理潛在的傳染性病原體。

所有溶液均含有ProClin 300作為防腐劑。切勿用嘴移液或讓試劑或患者樣本接觸皮膚。含有ProClin的試劑可能會引起刺激。避免與皮膚和眼睛接觸。如果發(fā)生接觸，請用大量水沖洗。

該試劑盒中包含的所有危險(xiǎn)成分的材料安全數(shù)據(jù)表可根據(jù)Svar Life Science的請求提供。

Svar Life Science補(bǔ)體系統(tǒng)篩選試劑盒樣本收集：

應(yīng)使用無菌靜脈穿刺技術(shù)收集血液樣本，并使用標(biāo)準(zhǔn)程序獲取血清。建議最少收集5毫升全血。讓血液在血清管中于室溫（20-25°C）下凝固60-65分鐘。離心血樣并將無細(xì)胞血清轉(zhuǎn)移到干凈的試管中。必須正確處理血清以防止體外補(bǔ)體激活。血清應(yīng)冷凍在-70°C或更低溫度的密封管中以延長儲存時(shí)間或使用干冰運(yùn)輸。樣本不應(yīng)凍融超過一次。避免使用出現(xiàn)黃疸、脂血和溶血的血清。不可使用熱滅活血清。不可使用血漿。NCCLS為儲存血液標(biāo)本提供了建議（《血液標(biāo)本的處理和加工程序標(biāo)準(zhǔn)操作程序》，H18A，1990年）。

Svar Life Science補(bǔ)體系統(tǒng)篩選試劑盒試劑盒組分和試劑儲存：

一個(gè)帶有可分離孔的框架（4x8x3），密封在帶有干燥劑的箔包裝中。4條藍(lán)色經(jīng)典途徑（CP）條，涂有人類IgM。4條綠色甘露聚糖結(jié)合凝集素（MBL）途徑（MP）條，涂有甘露聚糖。4條無色替代途徑（AP）條，涂有脂多糖。

10毫升經(jīng)典途徑稀釋液（Dil CP），標(biāo)為藍(lán)色。

10毫升甘露聚糖結(jié)合凝集素途徑稀釋液（Dil MP），標(biāo)為綠色。

10毫升替代途徑稀釋液（Dil AP），標(biāo)為紅色。

13毫升含有堿性磷酸酶標(biāo)記的C5b-9抗體的結(jié)合物（藍(lán)色）。

13毫升即用底物溶液。

30毫升30倍濃縮的洗滌液。

0.2毫升陰性對照（NC），含有人類血清（需按待測血清樣本進(jìn)行稀釋）。

0.2毫升陽性對照（PC），含有凍干人類血清，見下文“陽性對照的重懸"。 試劑盒中的所有試劑除洗滌液和對照外均已備好。試劑應(yīng)儲存在2-8°C，除陽性對照外。陽性對照應(yīng)儲存在-20°C。

Svar Life Science補(bǔ)體系統(tǒng)篩選試劑盒性能特征：

在三種測定中測試了120份來自獻(xiàn)血者的血清，計(jì)算了正常參考范圍。值以陽性對照的百分比表示。見圖1和表1。在CP測定中，沒有一個(gè)獻(xiàn)血者低于40%。在MP測定中，23個(gè)樣本低于10%，它們有MBL值（在單獨(dú)的測定中確定）低于500納克/毫升，在AP測定中，沒有一個(gè)獻(xiàn)血者低于10%。請注意，在正常人群中，真正的MP缺乏，即活性<10%，可能以20-30%的頻率出現(xiàn)。