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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>ALPCO-大鼠超敏胰島素ELISA檢測原理和樣本處理方案
ALPCO大鼠超敏胰島素ELISA用于定量測定大鼠血清和血漿中的胰島素。
該試劑盒設(shè)計用于5µL或25µL的樣本量。適用于該測定的五個標(biāo)準(zhǔn)品和兩個對照品將根據(jù)所使用的樣本量來確定。
艾美捷大鼠超敏胰島素ELISA(ALP-80-INSRTU-E01)檢測原理:
ALPCO大鼠超敏胰島素ELISA是一種夾心型免疫測定法。96孔微孔板涂有胰島素特異性單克隆抗體。將標(biāo)準(zhǔn)品、對照品和樣品加入到帶有共軛物的微孔板孔中。然后將微孔板在微孔板振蕩器上以700-900rpm的速度培養(yǎng)。第一次孵育完成后,用洗滌緩沖液洗滌孔并吸干。加入TMB底物,在微孔板振蕩器上以700-900rpm的速度第二次孵育微孔板。一旦第二次孵育完成,加入停止溶液,用分光光度計在450nm處測量光密度(OD)。產(chǎn)生的顏色強(qiáng)度與樣品中胰島素的量成正比。
所需材料
1用于分配5、25、75和100微升的精密移液管(帶一次性吸頭)
2用于分配75和100微升的重復(fù)或多通道移液管
3用于試劑配制的容量瓶和移液管
4用于試劑配制的蒸餾水或去離子水
5微孔板洗滌器或洗滌瓶
6能夠以700-900轉(zhuǎn)每分鐘速度振蕩的微孔板振蕩器
7帶有450納米濾光片的微孔板讀數(shù)器
8用于樣本制備的渦旋混合器
注意事項
1. 本試劑盒中包含的人血制品已檢測是否含有HIV(人類免疫缺陷病毒)、HBV(乙型肝炎病毒)和HCV(丙型肝炎病毒)。這些病毒的檢測方法不能保證病毒的絕對不存在;因此,所有試劑應(yīng)被視為潛在傳染性物質(zhì)。處理和處置應(yīng)符合所有適當(dāng)?shù)膰液偷胤椒ㄒ?guī),以處理潛在的生物危害物質(zhì)。
2. 所有來自動物源的材料均為BSE(瘋牛?。╆幮?。然而,所有材料應(yīng)被視為潛在傳染性物質(zhì)。
3. 避免直接接觸皮膚。
4. 本產(chǎn)品不得內(nèi)服。
5. 使用本產(chǎn)品時,避免進(jìn)食、飲水或吸煙。
6. 不要使用口吸移液管吸取任何試劑。
7. 試劑盒中的試劑是特定批次的,不得替換。
8. 不要使用超過有效期的試劑。
9. 不建議更改測試程序,可能會影響測試結(jié)果。
儲存條件
試劑盒應(yīng)儲存在2-8°C的環(huán)境中。試劑盒在盒標(biāo)簽上的有效期前是穩(wěn)定的。
樣本處理
血清和血漿樣本適用于本檢測。不需要稀釋或處理樣本。然而,如果樣本的胰島素濃度高于最高標(biāo)準(zhǔn),應(yīng)將樣本稀釋在零標(biāo)準(zhǔn)中,并重復(fù)分析。為了減少潛在的時間相關(guān)的樣本漂移,建議在使用前c底渦旋每個樣本,并在每次移液操作中不停頓。樣本可以在分析前在2-8°C下儲存24小時。對于更長時間,建議在<-20°C下儲存。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
典型標(biāo)準(zhǔn)曲線:
以下結(jié)果僅用于演示目的,不能代替測定獲得的數(shù)據(jù)。每次分析運行和平板測試都必須繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
大鼠超敏胰島素ELISA文獻(xiàn)參考:
Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.
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