ALPCO小鼠超靈敏胰島素ELISA是夾心型免疫測定。96孔微孔板用胰島素特異性單克隆抗體包被。將標準品、對照品和樣品加入含有結(jié)合物的微孔板威爾斯孔中。然后將微孔板在微孔板振蕩器上以700-900 rpm孵育。第一次孵育完成后，用洗滌緩沖液洗滌威爾斯孔并吸干。加入TMB底物，并在微孔板振蕩器上以700-900 rpm第二次孵育微孔板。第二次孵育完成后，加入終止液，并通過分光光度計在450 nm處測量光密度（OD）。產(chǎn)生的顏色強度與樣品中胰島素的量成正比。

艾美捷小鼠超敏胰島素ELISA試劑盒（ALP-80-INSMSU-E01）設(shè)計用于5µL或25µL的樣本量。適用于該測定的五個標準品和兩個對照品將根據(jù)所使用的樣本量來確定。

供應(yīng)的材料1：

Component Quantity Preparation

Insulin Microplate(96 wells) 12x8 strips Ready to use

Zero Standard 5mL Ready to use

"Standards (A-G)*

(0.025,0.09,0.188,0.5,1.25,3.75,6.9

ng/mL)" 1 mL each Ready to use

Control Levels 1,2,and 3* 1 vial each Lyophilized

Conjugate Stock 0.9 mL 11X

Conjugate Buffer 9 mL Ready to use

Wash Buffer Concentrate 40 mL 21X

TMB Substrate 12 mL Ready to use

Stop Solution 12 mL Ready to use

Plate Sealers 3 Ready to use

供應(yīng)的材料2：

Component Quantity Preparation

Insulin Microplate (96 wells) 10x(12x8 strips) Ready to use

Zero Standard 5mL Ready to use

"Standards (A-G)*

(0.025,0.09,0.188,0.5,1.25,3.75,

6.9 ng/mL)" 1 mL each Ready to use

Control Levels 1,2,and 3* 1 vial each Lyophiized

Conjugate Stock 9 mL 11X

Conjugate Buffer 90 mL Ready to use

Wash Buffer Concentrate 2x200  mL 21X

TMB Substrate 120 mL Ready to use

Stop Solution 120 mL Ready to use

Plate Sealers 20 Ready to use

注意事項：

1. 此試劑盒中包含的人血液制品已檢測HIV（人類免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）的存在。這些病毒的檢測方法不能保證病毒的W

全不存在；因此，應(yīng)將所有試劑視為潛在的感染源。處理和處置應(yīng)符合所有適當?shù)膰液偷胤椒ㄒ?guī)，以處理潛在的生物危害材料。

2. 所有來自動物來源的材料均為BSE陰性。然而，應(yīng)避免與反芻動物接觸。

3. 避免直接與皮膚接觸。

4. 本產(chǎn)品不可內(nèi)服。

5. 使用本產(chǎn)品時，避免進食、飲水或吸煙。

6. 不要使用嘴來移液任何試劑。

7. 此試劑盒中的試劑是特定批次的，不得替換。

8. 不要使用超過有效期的試劑。

9. 不建議更改測試程序，可能會影響測試結(jié)果。

樣本處理：

血清和血漿樣本適用于此測定。不需要稀釋或處理樣本。然而，如果樣本的胰島素濃度高于最高標準，則應(yīng)將樣本稀釋在零標準中，并重復(fù)分析。為了減少潛在的時間相關(guān)的樣本漂移，建議在使用前C

底渦旋每個樣本，并在不停頓的情況下執(zhí)行每次移液操作。樣本可以在2-8°C下儲存24小時，然后在此測定中分析。對于更長時間，建議在<-20°C下儲存。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

小鼠超敏胰島素ELISA試劑盒文獻參考：

Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.

小鼠超敏胰島素ELISA試劑盒5µL樣本量：

標準0.188、0.5、1.25、3.75和6.9 ng/mL（C-G）以及對照水平2和3。