UbcH5c(也稱為泛素結合酶E2 D3,UBE2D3)是UbcH5蛋白家族的E2結合泛素蛋白。E2結合泛素蛋白以ATP依賴的方式從E1接收泛素并將其轉移到E3。UbcH5c調節(jié)核因子κB(NF-κB)和p53腫瘤抑制因子等轉錄因子的泛素化,從而參與風濕性關節(jié)炎(RA)和癌癥等疾病。UbcH5c的小分子抑制劑具有其他p53表達水平和活性,因此是癌癥治療中有前途的候選治療藥物。
UbcH5c TR-FRET檢測試劑盒是一種均勻、靈敏的TR-FRET(時間分辨熒光共振能量轉移)檢測試劑盒,旨在測量UbcH5b(泛素結合酶E2 D3)泛素化活性。該試劑盒使用生物素標記的泛素和鋱標記的抗體識別His標記的UbcH5c蛋白,以完成TR-FRET配對。該試劑盒包含足夠的純化的UbcH5 c、純化的UBE1、生物素泛素、抗His-Tb標記的供體、染料標記的受體和400個反應的測定緩沖液。
圖1:UbcH5c TR-FRET檢測試劑盒示意圖。
鋱標記的抗His抗體結合His標記的E2結合蛋白,而染料標記的鏈霉抗生物素蛋白受體結合生物素泛素。當泛素轉移到E2酶時,復合物形成,TR-FRET信號使用能夠測量時間分辨熒光共振能量轉移的熒光板讀數器進行測量。TR-FRET信號與UbcH5c活性成正比
艾美捷UBCH 5c TR-FRET檢測試劑盒:
貨號: BPS-79901
檢測試劑盒格式: TR-FRET
物種: 人類
需自備材料:
能夠測量時間分辨熒光共振能量轉移(TR-FRET)的熒光微孔板閱讀器
可調節(jié)的微量移液管和無菌吸頭
軌道搖床
UniProt #UBE1: P22314; UBCH5c: P61077
儲存/穩(wěn)定性: 如果按照指示儲存材料,該檢測試劑盒從收到之日起最佳性能可維持長達6個月。
應用: 篩選抑制Ubch5c活性的分子,在藥物發(fā)現高通量篩選(HTS)應用中。
運輸溫度: -80°C
禁忌: UbcH5c TR-FRET檢測試劑盒與高達1%最終DMSO濃度兼容。我們建議在U2檢測緩沖液中以不超過10% DMSO溶液準備抑制劑,并每個孔使用2 μl。
避免凍融循環(huán)。
文獻參考:
1. Saville, M.K., et al., J. Biol. Chem. 2004; 279(40): 42169-81.
2. Kim, J.-H., et al., BMB Rep. 2015; 48(1): 25-29.
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