膠原蛋白是細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分之一。膠原蛋白生成的失調(diào)可能導(dǎo)致如纖維化（膠原蛋白過(guò)多）或骨關(guān)節(jié)炎（膠原蛋白過(guò)少）等病理狀態(tài)。因此，在許多與疾病相關(guān)的研究中，測(cè)量膠原蛋白的生成是重要的。QuickZyme敏感組織膠原蛋白檢測(cè)試劑基于羥脯氨酸的檢測(cè)。羥脯氨酸是一種非蛋白質(zhì)氨基酸，在哺乳動(dòng)物中主要出現(xiàn)在膠原蛋白中。組織水解產(chǎn)物中的羥脯氨酸可以用作組織中膠原蛋白含量的直接測(cè)量。

膠原蛋白的測(cè)量從在6M鹽酸中于95°C w全水解組織樣本開(kāi)始。在水解產(chǎn)物中，使用Prockop和Udenfriend描述的方法的改進(jìn)版本（《分析生物化學(xué)》，1960年，1: 228-239）來(lái)定量羥脯氨酸殘基。該檢測(cè)測(cè)量樣本中存在的總羥脯氨酸量，這代表了樣本中存在的所有類(lèi)型的膠原蛋白，而不會(huì)區(qū)分膠原蛋白的類(lèi)型以及前膠原蛋白、成熟膠原蛋白和膠原蛋白降解產(chǎn)物。

與其他基于羥脯氨酸的檢測(cè)相比，QuickZyme敏感組織膠原蛋白檢測(cè)沒(méi)有基質(zhì)效應(yīng)，也不需要對(duì)水解產(chǎn)物進(jìn)行稀釋?zhuān)瑥亩軌蛟谀z原蛋白濃度較低的小樣本中進(jìn)行測(cè)量。該檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，并且不需要酸水解后的干燥步驟，這通常需要特殊設(shè)備。

現(xiàn)在可以在膠原蛋白水平較低的小組織樣本中輕松確定膠原蛋白

艾美捷QuickZyme Biosciences敏感組織膠原蛋白檢測(cè)試劑盒基于通過(guò)膠原蛋白的酸水解獲得的羥脯氨酸殘基的定量比色測(cè)定。敏感組織膠原蛋白檢測(cè)沒(méi)有基質(zhì)效應(yīng)，也不需要對(duì)水解產(chǎn)物進(jìn)行進(jìn)一步稀釋?zhuān)瑥亩軌蛟谌绺闻K這樣的膠原蛋白濃度較低的小樣本中進(jìn)行測(cè)量。該檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，并且不需要酸水解后的干燥步驟，因此在水解步驟之后，可以在快速（小于2小時(shí)）且簡(jiǎn)便（96孔板格式）的檢測(cè)中進(jìn)行。

數(shù)據(jù)分析：

數(shù)據(jù)分析有幾種可選的方法。建議使用一個(gè)軟件包來(lái)處理數(shù)據(jù)，該軟件包采用回歸曲線(xiàn)擬合程序。如果沒(méi)有可用的軟件包，可以按照以下方法手動(dòng)計(jì)算膠原蛋白濃度。

1、計(jì)算每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的重復(fù)讀數(shù)的平均值，并從所有讀數(shù)中減去空白的平均值。

2、通過(guò)在y軸上繪制每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的平均A570（減去空白）與x軸上的膠原蛋白含量相對(duì)應(yīng)（0-6.25–12.5–25-50–100–200–300微克膠原蛋白/毫升水解產(chǎn)物），創(chuàng)建一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。在圖表上的點(diǎn)之間畫(huà)出最佳擬合的線(xiàn)性化曲線(xiàn)。使用這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)將測(cè)試樣本的A570值轉(zhuǎn)換為微克/毫升膠原蛋白。這樣就可以得到水解樣本中的膠原蛋白濃度。如果水解后包括了稀釋步驟，這個(gè)濃度應(yīng)該乘以稀釋因子，以得到水解樣本中的膠原蛋白濃度。

典型的膠原蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

相關(guān)產(chǎn)品：

Total Collagenassay

Hydroxyproline assay

Sensitive Tissue Hydroxyproline assay

Soluble Collagen assay

Total Protein assay

GranzymeB activityReagent Set

Human MMP-2 activity assay

Human MMP-7 activity assay

Human MMP-8 activityassay

Human MMP-9 activityassay

MouseMMP-9 activity assay

Human MMP-14 activity assay

HumanTIMP-1 ELISA

Human Urokinase (uPA)ELISA

艾美捷科技是QuickZyme Biosciences的中國(guó)代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。