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亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的基因組DNA的PCR設(shè)計(jì)中Z重要的挑戰(zhàn)之一是引物的設(shè)計(jì)和優(yōu)化,以減少PCR偏差。當(dāng)旨在為定量甲基化保留甲基化和非甲基化CpG位點(diǎn)的定量比率時(shí),引物設(shè)計(jì)必須不帶偏見,這樣它就不會(huì)選擇一種類型的片段而不是另一種類型。
甲基化分析的本質(zhì)是,甲基化和非甲基化的DNA分子將以截然不同的效率被擴(kuò)增。這是由于二級(jí)結(jié)構(gòu)的形成(引物環(huán)和二聚體、模板環(huán)、錯(cuò)序)以及CpG位點(diǎn)的T和G以及C/T變異的長(zhǎng)串。位于CpG位點(diǎn)的引物可以選擇性地?cái)U(kuò)增甲基化或非甲基化片段,可能在最終的甲基化分析中產(chǎn)生偏差。
EpigenDx在PCR和檢測(cè)設(shè)計(jì)方面具有專業(yè)知識(shí),使用定量焦測(cè)序甲基化技術(shù)驗(yàn)證檢測(cè)條件,以確保甲基化和非甲基化DNA以相同的效率擴(kuò)增。EpigenDx為客戶提供完整的引物組和檢測(cè)條件,針對(duì)亞硫酸氫鹽測(cè)序和其他DNA甲基化應(yīng)用(如COBRA和HRM實(shí)時(shí)PCR)進(jìn)行了優(yōu)化。
EpigenDx預(yù)驗(yàn)證的甲基化測(cè)定內(nèi)容:
定制引物組套件,100次反應(yīng)*
PCR擴(kuò)增的檢測(cè)條件
艾美捷EpigenDx預(yù)驗(yàn)證的甲基化測(cè)定:
超過12,000種現(xiàn)成驗(yàn)證的檢測(cè)和引物組套件,用于:
1、亞硫酸鹽測(cè)序
2、MS-HRM(熔解曲線高分辨率熔解分析)
3、焦磷酸測(cè)序
4、靶向亞硫酸鹽次世代測(cè)序(NGS)
5、DNA甲基化分析
6、人類、小鼠、大鼠、猴子等
7、專為特異性擴(kuò)增亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化的DNA而準(zhǔn)備。
EpigenDx專注于疾病生物標(biāo)記物發(fā)現(xiàn)、驗(yàn)證和分子診斷的基因組和表觀基因組研究領(lǐng)域。EpigenDx擁有廣泛的知識(shí)和經(jīng)驗(yàn),擅長(zhǎng)于Pyrosequencing、靶向下一代測(cè)序、亞硫酸鹽測(cè)序等表觀基因組研究分析技術(shù)和方法。艾美捷科技是EpigenDx的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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