HiSense™ cDNA合成主混合液是一種全合一（All-in-one）格式的產(chǎn)品，它允許更方便、更快速地合成第一鏈cDNA。該主混合液含有M-MLV（莫洛尼鼠白血病病毒）逆轉(zhuǎn)錄酶（RTase）、核糖核酸酶抑制劑、dNTPs（去氧核苷酸三磷酸）和Oligo（dT）引物。

Oligo (dT) 是能夠與 mRNA 的 3'-Poly(A) 尾部退火的寡核苷酸。Oligo (dT) 的用途僅限于具有 3'-Poly(A) 尾部的 mRNA 或總 RNA 模板。

一般說明：

1) 富集的聚腺苷酸 (poly(A)+) mRNA 和總 RNA 都可用于第一鏈 cDNA 的合成，但富集的聚腺苷酸 mRNA 可能會產(chǎn)生更高的產(chǎn)量和最終產(chǎn)品更好的純度。

2) RNA 樣本必須無基因組 DNA 污染。

3) 為了去除與 cDNA 互補(bǔ)的 RNA，加入 1 µl (2 U) 的大腸桿菌核糖核酸酶 H 并在 37°C 下孵育 20 分鐘。

4) 第一鏈 cDNA 合成完成后，cDNA 產(chǎn)物可以直接作為模板用于標(biāo)準(zhǔn) PCR/qPCR。

艾美捷CellSafe HiSense cDNA合成主混合液#CDS-100, CDS-200, CDS-400, CDSM-200, CDSM-400, LCDS-96, LCDS-480操作步驟：

1) 在冰上解凍 RNA 模板和全合一 5X cDNA 主混合液。輕輕但che底地混合溶液。

2) 在冰上的 PCR 管中準(zhǔn)備以下反應(yīng)混合物。

3) 充分混合組分并通過簡短的離心收集。在以下反應(yīng)條件下孵化混合物。

4) 新合成的第一鏈 cDNA 已準(zhǔn)備好用于立即的下游應(yīng)用，或在 -20°C 下長期儲存。

CellSafe HiSense cDNA合成主混合液 qPCR結(jié)果：

使用HiSense™QGreenBlue qPCR Master Mix（目錄號QBLR-05）擴(kuò)增人cDNA的GAPDH基因（217bp片段）

CellSafe HiSense HiSense cDNA合成主混合液相關(guān)產(chǎn)品：

HiSense DLRTaq PCR Polymerase/ Master Mix/ Premix

HiSense Multiplex PCR Master Mix/ Premix

HiSense QPlex qPCR Master Mix

HiSense QGreenBlue qPCR Master Mix

CellSafe致力于提供支原體全面解決方案，可以有效檢測、消除和預(yù)防影響細(xì)胞培養(yǎng)的支原體。作為CellSafe在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的CellSafe產(chǎn)品。