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初級(jí)會(huì)員 | 第5年

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二硝基苯酚修飾的核苷酸Digoxigenin-11-dUTP

時(shí)間:2024/4/8閱讀:73
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Digoxigenin-11-dUTP,通過(guò)PCR,Nick Translation等應(yīng)用整合到DNA / cDNA中,用于DNA / cDNA探針的制備,測(cè)序等方面。

 

Digoxigenin-11-dUTP可通過(guò)以下方法整合到DNA/cDNA中:

1.Taq聚合酶進(jìn)行PCR

2.DNAse I / DNA聚合酶I進(jìn)行Nick Translation

3.Klenow exo-進(jìn)行引物延伸

4.用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)標(biāo)記寡核苷酸3'末端

5.MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄

 

Digoxigenin-11-dUTP可通過(guò)以下方法整合到RNA中:

用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)標(biāo)記3'末端

推薦的用于PCRNick TranslationDigoxigenin-11-dUTP / dTTP比例:35% 高辛-11-dUTP / 65dTTP

 

請(qǐng)注意:Digoxigenin-11-dUTP的終濃度取決于應(yīng)用和實(shí)驗(yàn)條件。為獲得良好的產(chǎn)品收率和高摻入率,建議單獨(dú)優(yōu)化Digoxigenin-11-dUTP / dTTP比率

 

艾美捷Digoxigenin-11-dUTP,高辛/二硝基苯酚NU-803-DIGXS):

運(yùn)輸:通過(guò)凝膠包進(jìn)行運(yùn)輸。

存儲(chǔ)條件:應(yīng)在-20°C的環(huán)境下保存。

短期(累計(jì)最多1周)暴露于室溫下是可行的。

保質(zhì)期:12個(gè)月。

分子式:C43H65N4O21P3(自由酸形式)。

分子量:1066.91/摩爾(自由酸形式)。

精確質(zhì)量:1066.34/摩爾(自由酸形式)。

純度:高于或等于95%(通過(guò)高效液相色譜法測(cè)定)。

形態(tài):在10 mM Tris-HCl溶液中的過(guò)濾溶液,分子量截留30 kDa。

顏色:無(wú)色至淡黃色。

濃度:1.0 mM1.1 mM。

pH值:7.5,誤差范圍±0.5。

光譜特性:zui大吸收波長(zhǎng)λmax290納米,摩爾吸光系數(shù)ε為8.8 L·摩爾^-1·厘米^-1Tris-HCl,pH 7.5)。

應(yīng)用:

生物素-11-dUTP可以通過(guò)以下方法嵌入到DNAcDNA中:

使用Taq聚合酶進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)。

利用DNAI/DNA聚合酶I進(jìn)行缺口翻譯(Nick Translation)。

使用Klenow exo-進(jìn)行引物延伸(Primer Extension)。

使用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase,簡(jiǎn)稱TdT)進(jìn)行3'端標(biāo)記。

使用MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。

 

此外,生物素-11-dUTP還可以通過(guò)以下方法嵌入到RNA中:

使用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)進(jìn)行3'-端標(biāo)記。

 

Digoxigenin-11-dUTP相關(guān)產(chǎn)品:

HighFidelity Digoxigenin PCR Labeling Kit, #APP-101-DIGX

Digoxigenin NT Labeling Kit, #PP-310-DIGX

 


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