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　　紫外分光光度法定量測(cè)定的依據(jù)是比耳定律，即物質(zhì)在一定濃度的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比。許多有機(jī)化合物在紫外區(qū)具有特征的吸收光譜，因此可用紫外分光光度法對(duì)有機(jī)物質(zhì)進(jìn)行定性鑒定，結(jié)構(gòu)分析及定量測(cè)定.其基本工作原理和紅外光譜儀相似，利用一定頻率的紫外--可見光照射被分析的有機(jī)物質(zhì)，引起分子中價(jià)電子的躍遷，它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長(zhǎng)而變化的光譜，反映了試樣的特征。在紫外可見光的范圍內(nèi)，對(duì)于一個(gè)特定的波長(zhǎng)，吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度，因此測(cè)量光譜可以進(jìn)行定性分析，而且根據(jù)吸收與已知濃度的標(biāo)樣的比較，還能進(jìn)行定量分析。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。

 

　　賽默飛紫外分光光度計(jì)的檢測(cè)過程：

　　光線穿過樣品后，檢測(cè)器用于將光線轉(zhuǎn)換為可讀的電子信號(hào)。通常，探測(cè)器基于光電涂層或半導(dǎo)體。

 

　　光電涂層在暴露于光噴出帶負(fù)電荷的電子。當(dāng)電子被射出時(shí)，會(huì)產(chǎn)生與光強(qiáng)成正比的電流。光電倍增管(PMT)是紫外-可見光譜中較常用的檢測(cè)器之一。PMT基于光電效應(yīng)，在曝光時(shí)首先發(fā)射電子，隨后發(fā)射的電子依次倍增以產(chǎn)生更大的電流。PMT檢測(cè)器對(duì)于檢測(cè)非常低的光強(qiáng)度特別有用。

 

　　當(dāng)半導(dǎo)體暴露在光下時(shí)，可以通過與光強(qiáng)成正比的電流。更具體地說，光電二極管和電荷耦合器件(CCD)是兩種常見的基于半導(dǎo)體技術(shù)的檢測(cè)器。

 

　　使用任何探測(cè)器產(chǎn)生電流后，信號(hào)就會(huì)被識(shí)別并輸出到計(jì)算機(jī)或屏幕上。