關(guān)于離心原理與離心參數(shù)的介紹--強(qiáng)森科技
1.離心概述
1.1離心原理
在離心力作用下,混合物質(zhì)由于密度差異而沉積分離。離心時(shí)間由物質(zhì)的密度和施加的離心力決定
>密度越大,越快沉降到達(dá)管底(密度=質(zhì)量/體積)
>離心力越大,離心分離時(shí)間越短
離心分離按照應(yīng)用可分為離心沉降和離心過濾兩種
離心沉降 利用懸浮液(或乳濁液)密度不同的各組分在離心力場(chǎng)中迅速沉降分層的原理,實(shí)現(xiàn)液-固或液-液(相)分離。日常實(shí)驗(yàn)應(yīng)用有沉淀離心、密度梯度離心、等密度梯度離心等。
>沉淀離心 是離心機(jī)zui常見的應(yīng)用,即通過離心使固體集聚沉淀在離心管底部從而與液體(上清液)分開。在相分離的過程中。溶質(zhì)從而分散狀態(tài)或者溶液介質(zhì)中轉(zhuǎn)移到另一種溶劑中(來進(jìn)行化學(xué)/分子生物學(xué)分析)。
>等密度梯度離心 是指在離心力場(chǎng)下,在密度梯度介質(zhì)中,顆粒移動(dòng)到與它們各自的密度恰好相等的位置,形成一系列密度區(qū),從而使不同密度的物質(zhì)得到分離。
離心過濾 使懸浮液在離心力場(chǎng)下產(chǎn)生的離心壓力,作用在過濾介質(zhì)上,使液體通過過濾介質(zhì)成為濾液,而固體顆粒被截留在過濾介質(zhì)表面,從而實(shí)現(xiàn)液-固分離。例如超濾膜離心分離純化大分子物。
1.2離心參數(shù)
對(duì)于一臺(tái)離心機(jī)來說比較重要的一下參數(shù):相對(duì)離心力/轉(zhuǎn)速、K因子、離心時(shí)間、溫度等
1.2.1 相對(duì)離心力/轉(zhuǎn)速
離心機(jī)通過離心力分離樣品,加速度和轉(zhuǎn)速是非常重要的參數(shù)。其中加速度是相對(duì)于地球表面的重力加速度g(9.81m/s²)而設(shè)置的。離心效果主要由相對(duì)離心力(rcf)來衡量。相比于每分鐘轉(zhuǎn)速(rpm),相對(duì)離心力更。
相同轉(zhuǎn)速(rpm)的轉(zhuǎn)子,離心半徑不同可以形成不同的相對(duì)離心力(rcf)。
以MiniSpin plus和5430R為例,同樣裝載1.5ml離心管,并以同樣轉(zhuǎn)速14000rpm離心。根據(jù)上圖公式,得到兩臺(tái)離心機(jī)的離心力分別為13100×g和20817×g,產(chǎn)生不同離心效果。
由此可見,轉(zhuǎn)速相同的情況下,離心半徑不同的轉(zhuǎn)子有不同的相對(duì)離心力。
Tips:除了MiniSpin之外,Eppendorf所有的離心機(jī)都可以實(shí)現(xiàn)離心力和轉(zhuǎn)速的自動(dòng)轉(zhuǎn)換。
1.2.1 K因子和時(shí)間(t)
K因子主要由轉(zhuǎn)子決定。在離心過程中,它影響離心所需要的沉降時(shí)間(t)。一般而言,它是離心管中沉降距離的一個(gè)量度標(biāo)準(zhǔn)。在離心管中,離心分離所需的時(shí)間(t)與沉降距離成正比。K因子取決于轉(zhuǎn)子中離心管的角度和使用的離心管類型。
K因子越小,意味著離心分離所需的時(shí)間越短,K因子還受轉(zhuǎn)速的影響,轉(zhuǎn)速越高,分離所
需的時(shí)間越短
通過計(jì)算兩個(gè)轉(zhuǎn)子的K因子,可以直接比較兩個(gè)轉(zhuǎn)子離心分離過程的相對(duì)轉(zhuǎn)速,K因子越小表明離心分離所需時(shí)間越短。
K因子和離心時(shí)間成正比:
如何選擇離心機(jī)
離心前請(qǐng)確保與參考實(shí)驗(yàn)方案使用相同類型的轉(zhuǎn)子、相同的相對(duì)離心力、離心溫度以及離心時(shí)間??偟膩碚f,要想成功離心,主要參數(shù)一下參考:
>樣品類型 >適配器類型
>離心耗材 >相對(duì)離心力
>離心機(jī)種類 >離心所需溫度
>轉(zhuǎn)子類型