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WI-38-WI-38 人胚肺成纖維細(xì)胞/STR鑒定
  • WI-38-WI-38 人胚肺成纖維細(xì)胞/STR鑒定

貨物所在地:上海上海市

地: 上海市徐匯區(qū)聚科生物園銀都路4

更新時(shí)間:2024-11-29 14:45:42

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WI-38 人胚肺成纖維細(xì)胞/STR鑒定
WI-38 人胚肺成纖維細(xì)胞介紹
WI-38人二倍體細(xì)胞系來(lái)自妊娠3個(gè)月的正常胚胎肺組織。該細(xì)胞系是首株用于人類疫苗制備的人二倍體細(xì)胞系。培養(yǎng)液中添加TNF alpha可以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。

WI-38 人胚肺成纖維細(xì)胞/STR鑒定介紹

WI-38人二倍體細(xì)胞系來(lái)自妊娠3個(gè)月的正常胚胎肺組織。該細(xì)胞系是首株用于人類疫苗制備的人二倍體細(xì)胞系。培養(yǎng)液中添加TNF alpha可以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。

細(xì)胞特性

1) 來(lái)源:正常肺

2) 形態(tài):成纖維細(xì)胞,貼壁生長(zhǎng)

3) 含量:>1x106 個(gè)/mL

4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性

5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

 

運(yùn)輸和保存

可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式

(1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;

(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長(zhǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

(3)收到細(xì)胞后請(qǐng)拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請(qǐng)及時(shí)拍照與我們聯(lián)系。
 
細(xì)胞用途:僅供科研使用。
 
WI-38 人胚肺成纖維細(xì)胞/STR鑒定接收后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2) 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)時(shí),在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度??醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X和20×物鏡下,同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細(xì)胞需要售后時(shí)提供收到細(xì)胞時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3) 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。
4) 貼壁細(xì)胞:在運(yùn)輸過(guò)程中貼壁細(xì)胞會(huì)有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長(zhǎng),可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。
5) 懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基)。
6)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后di一次傳代建議1:2傳代 。
           
細(xì)胞
培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。

下面T25瓶為類;

1,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

鏡像綺點(diǎn)(上海)細(xì)胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù):

一、原代細(xì)胞服務(wù)
       各類模式哺乳動(dòng)物的多種原代細(xì)胞資源;
       多種人源性正常及腫瘤原代細(xì)胞資源;
       原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等;
       原代細(xì)胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實(shí)驗(yàn)外包服務(wù);

二、細(xì)胞株/系服務(wù)
       細(xì)胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關(guān)說(shuō)明書(shū);
       細(xì)胞系培養(yǎng)過(guò)程的技術(shù)指導(dǎo);
       細(xì)胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關(guān)生長(zhǎng)因子、試劑等;

三、iPS細(xì)胞
       iPS細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無(wú)滋養(yǎng)層在);
       iPS細(xì)胞增殖及冷凍保存;
       iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實(shí)習(xí);
       新藥及實(shí)驗(yàn)儀器上市前評(píng)估;

四、技術(shù)外包服務(wù):各類細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、顯微鏡拍照服務(wù)等

五、其他:根據(jù)客戶需要定制服務(wù)等

序號(hào)

產(chǎn)品名稱

貨號(hào)

規(guī)格

售價(jià)

備注

1

培養(yǎng)基1640

icell-0002

500ml

140

 

2

培養(yǎng)基DMEM

icell-0001

500ml

140

 

3

培養(yǎng)基DMEM/F12

icell-0005

500ml

140

 

4

內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基ECMsciencel

icell-0016

500ml

2280

 

5

動(dòng)物上皮細(xì)胞培養(yǎng)基Epicm-a

icell-0015

500ml

1980

 

6

上皮細(xì)胞培養(yǎng)基Epicm

icell-0017

500ml

1980

 

7

Mccoy’s 5A 培養(yǎng)基

icell-0011

500ml

160

 

8

MEM培養(yǎng)基

icell-0012

500ml

140

 

9

FBS北美胎牛血清

GIBCO   16000-044

500ml

6800

 

10

FBS墨西哥胎牛血清

10437-028

500ml

5616

 

11

馬血清

gibco.16050122

500ml

1489

 

12

DMSO

sigma-D2650

100ml

1520

 

13

PBS片劑(1000ml)

09-9400-100

100片

4170

 

14

PS雙抗(進(jìn)口)

15140-122

100ml

452

 

15

胰蛋白酶

25200-072

500ml

665

 

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