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CCC-HPF-1 人胚肺成纖維細胞/STR鑒定
  • CCC-HPF-1 人胚肺成纖維細胞/STR鑒定

貨物所在地:上海上海市

地: 上海市徐匯區(qū)聚科生物園銀都路4

更新時間:2024-11-29 14:45:37

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( 聯(lián)系我們,請說明是在 化工儀器網 上看到的信息,謝謝?。?/p>

CCC-HPF-1 人胚肺成纖維細胞/STR鑒定
CCC-HPF-1 人胚肺成纖維細胞特性
1) 來源:肺
2) 形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長
3) 含量:1x10^6 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T75瓶或者1mL凍存管包裝
6) 準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%.

CCC-HPF-1 人胚肺成纖維細胞特性

1) 來源:肺
2) 形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T75瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式

(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;

(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

(3)收到細胞后請拍照,3天內如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。

CCC-HPF-1 人胚肺成纖維細胞用途:僅供科研使用。

接收后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2) 在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)時,在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,能準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在10X和20×物鏡下,同時給剛收到的細胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3) 觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。
4) 貼壁細胞:在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長,可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。
5) 懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基)。
6)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后di一次傳代建議1:2傳代 。

                     
CCC-HPF-1 人胚肺成纖維細胞
培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。

下面T25瓶為類;

1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1mlyi酶,細胞變圓脫落后,加入1ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產品和技術服務:

一、原代細胞服務
      各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源;
      多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源;
      原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等;
      原代細胞相關技術服務和整體實驗外包服務;

二、細胞株/系服務
      細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關說明書;
      細胞系培養(yǎng)過程的技術指導;
      細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等;

三、iPS細胞
      iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在);
      iPS細胞增殖及冷凍保存;
      iPS基礎培養(yǎng)技術實習;
      新藥及實驗儀器上市前評估;

四、技術外包服務:各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗、顯微鏡拍照服務等

五、其他:根據(jù)客戶需要定制服務等

序號

產品名稱

貨號

規(guī)格

售價

備注

1

培養(yǎng)基1640

icell-0002

500ml

140

2

培養(yǎng)基DMEM

icell-0001

500ml

140

3

培養(yǎng)基DMEM/F12

icell-0005

500ml

140

4

內皮細胞培養(yǎng)基ECMsciencel

icell-0016

500ml

2280

5

動物上皮細胞培養(yǎng)基Epicm-a

icell-0015

500ml

1980

6

上皮細胞培養(yǎng)基Epicm

icell-0017

500ml

1980

7

Mccoy’s 5A 培養(yǎng)基

icell-0011

500ml

160

8

MEM培養(yǎng)基

icell-0012

500ml

140

9

FBS北美胎牛血清

GIBCO   16000-044

500ml

6800

10

FBS墨西哥胎牛血清

10437-028

500ml

5616

11

馬血清

gibco.16050122

500ml

1489

12

DMSO

sigma-D2650

100ml

1520

13

PBS片劑(1000ml)

09-9400-100

100片

4170

14

PS雙抗(進口)

15140-122

100ml

452


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