目錄:鏡像綺點(上海)細胞技術(shù)有限公司>>細胞分類>>細胞系>> CT26.WTCT26.WT 小鼠結(jié)腸癌細胞/鏡像綺點(iCell)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1*10^6 |
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貨號 | CT26.WT | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 科研使用 |
CT26.WT 小鼠結(jié)腸癌細胞/鏡像綺點(iCell)介紹
CT26細胞是被N-亞硝基-N-甲基脲烷(NNMU)誘導(dǎo)得到的未分化的小鼠結(jié)腸癌細胞,該細胞的一個克隆形成的細胞系被命名為CT26.WT。CT26.WT被逆轉(zhuǎn)錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉(zhuǎn)化形成了一個致死性的亞克隆CT26.CL25,這一病毒載體含有l(wèi)acZ基因、編碼腫瘤相關(guān)抗原(TAA)和beta半乳糖苷酶。CT26.WT和CT26.CL25細胞在小鼠中生長速度和致死率都很相似,不同的是CT26.CL25細胞可以表達腫瘤相關(guān)抗原和beta半乳糖苷酶,因此這兩株細胞可以聯(lián)合用于免疫治療和宿主免疫反應(yīng)的研究。
細胞特性
1) 來源:小鼠結(jié)腸癌
2) 形態(tài):成纖維細胞樣,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式:
(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;
(2)存活細胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
(3)收到細胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。
細胞接受后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的*培養(yǎng)基。
4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。
5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
CT26.WT 小鼠結(jié)腸癌細胞/鏡像綺點(iCell)用途:僅供科研使用。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3. 輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進行。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。
下面T25瓶為類;
1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
鏡像綺點(上海)細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和服務(wù)介紹:
一、原代細胞服務(wù):
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等
原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)及整體實驗外包服務(wù)
二、細胞系服務(wù):
細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關(guān)說明書
細胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導(dǎo)
細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關(guān)生長因子、試劑等
三、iPS細胞服務(wù):
iPS細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習(xí)
新藥及實驗儀器上市前評估
四、其他技術(shù)外包服務(wù)、客戶定制服務(wù)等
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