功率放大器在MTT檢測超聲醫(yī)療中的應(yīng)用
實驗名稱:MTT檢測超聲激活血卟啉對SW-480細(xì)胞的殺傷作用
研究方向:超聲醫(yī)療
測試目的:
自提出激光與血卟啉結(jié)合具有明顯的抗腫瘤效應(yīng),PDT法在診治腫瘤方面已做了大量研究并在臨床中得到應(yīng)用。但由于激光對組織穿透力較差,使PDT對深層腫瘤的治療受到限制。與激光相比,超聲是一種機械波,它對生物組織有較強的穿透力,并可無創(chuàng)傷地將聲能聚焦于深層組織。超聲可激活包括有機光敏(如血卟啉)在內(nèi)的某些藥物,產(chǎn)生比單純超聲更加明顯的抗腫瘤效應(yīng)。超聲結(jié)合光敏劑治療腫瘤的方法被稱為聲動力學(xué)療法(簡稱SDT)。迄今為止國內(nèi)外學(xué)者的研究多集中于單一介質(zhì)中SDT法對腫瘤殺傷作用的探討。本文選擇體外培養(yǎng)的人結(jié)腸癌細(xì)胞SW-480,用不同頻率聚焦超聲激活血卟咻的方法處理不同介質(zhì)中的腫瘤細(xì)胞,采用MTT法檢測細(xì)胞的損傷結(jié)果,為探討SDT的殺傷機理積累資料。
測試設(shè)備:ATA-8202功率放大器、換能器、照射水槽、溫度計、微型低速點擊、CO2培養(yǎng)箱。
實驗過程:
待細(xì)胞長至對數(shù)期,消化細(xì)胞,分別用NaC1、PRMI1640、培養(yǎng)基(M)將細(xì)胞密度調(diào)至1X106cells/mL。隨后,細(xì)胞分為四組:(1)對照一組:細(xì)胞懸液,不進行超聲處理,(2)對照二組:加入血卟啉的細(xì)胞懸液,不進行超聲處理,37℃孵育30min,(3)實驗一組為單純超聲照射組。細(xì)胞直接進行超聲照射,(4)實驗二組為超聲+血卟啉組,細(xì)胞懸液中加入血卟啉(終濃度為0.lmg/mL),37C℃孵育30min,之后進行超聲照射。聲照頻率分別為1.1,1.6,2.3MHz;各頻率照射聲強均為1.5W/cm2。
超聲處理后四組細(xì)胞分別接種于96孔板中,每個處理設(shè)4-5個復(fù)孔,每孔接種0.lmL細(xì)胞懸液及0.01mLMTT溶液。以上操作均在避光條件下進行。接種后的96孔板于CO2孵箱中孵育4h后,離心25分鐘(4000rpm),吸棄上清,每孔加0.2mLDMSO(分析純),酶標(biāo)儀檢測光吸收值(A值),計算相對存活率(實驗組A值/對照組A值)。
各實驗組所得數(shù)據(jù)列表如下:表1、表2、表3分別顯示在NaC1溶液、PRMI1640、培養(yǎng)基中SW-480細(xì)胞經(jīng)1.1,1.6,2.3MHz,1.5W/cm2超聲輻照后MTT解育4小時后細(xì)胞的相對存活率,圖1顯示SW-480細(xì)胞在不同溶液中經(jīng)2.3MHz,1.5W/cm2超聲輻照后MTT解育4h后的細(xì)胞相對存活率,表4顯示在Nac1、PRMI1640、培養(yǎng)基中SW-480細(xì)胞經(jīng)23.MHz,1.5W/cm2超聲輻照12h后MTT解育4h后細(xì)胞的相對存活率。
實驗結(jié)果:
當(dāng)聲照強度為1.5W/cm2時,在2.3MHz頻率的單純超聲照射下,SW-480細(xì)胞在NaCI溶液和培養(yǎng)基中細(xì)胞的相對存活率都接近100%,在PRMI1640溶液中,細(xì)胞的相對存活率達(dá)120%,說明2.3MHz頻率的單純超聲照射對SW-480細(xì)胞幾乎沒有殺傷作用,反而有輕微的促生長作用。而在以上三種溶液中,發(fā)現(xiàn)在2.3MHz頻率下超聲+血卟啉照射使SW-480細(xì)胞的死亡率明顯增加,經(jīng)t檢驗,A,B兩組的結(jié)果之間存在極顯著性差異(p<0.01),這表明在相同聲照強度和頻率下加入血卟啉可以增強超聲對細(xì)胞的殺傷效果。實驗結(jié)果還顯示:當(dāng)聲照強度為1.5W/cm2,在1.1MHz、1.6MHz頻率超聲照射下,在三種溶液中(1.6MHz頻率,PRMI640溶液中除外,其A組與B組數(shù)值之間有顯著差異,但無極顯著差異,經(jīng)t檢驗,其p<0.05。)A組與B組數(shù)值之間無顯著差異,經(jīng)t檢驗,其p>0.05,這表明在1.1MHz、1.6MHz,聲強為1.5W/cm2下加入血卟啉不能增強超聲對SW-480細(xì)胞的殺傷效果。表1-3和圖1的實驗結(jié)果還顯示:聲照強度為1.5W/cm2時,同一頻率下,針對30~120秒內(nèi)聲照時間對SW-480細(xì)胞的相對存活率無明顯影響。
圖1溶液照射四小時后的相對存活率
表1在不同溶液超聲照射12h后的相對存活率
表2在不同頻率超聲波照射4h后的相對存活率
安泰ATA-8202射頻功率放大器:
本文實驗素材由西安安泰電子整理發(fā)布。Aigtek已經(jīng)成為在業(yè)界擁有廣泛產(chǎn)品線,且具有相當(dāng)規(guī)模的儀器設(shè)備供應(yīng)商,樣機都支持免費試用。