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氮磷鈣測定儀操作說明書

 NPCa-02型氮磷鈣測定儀是在KDN型定氮儀的基礎(chǔ)上，改進(jìn)設(shè)計(jì)，研制而成的。

氮磷鈣消化裝置在150℃--500℃范圍內(nèi)任意調(diào)節(jié)，同時(shí)只要將催化劑硫酸銅和硫酸鉀換成雙氧水。將消化液定容后分別可測定粗蛋白、磷和鈣的含量。這種催化劑既有較快的消化速度，在消化液中又不留干擾物質(zhì)影響粗蛋白、磷、鈣的測定儀。在測定鈣時(shí)用乙二胺四乙酸二鈉鹽法，即EDTA法（GB6436-86），從而巧妙地實(shí)現(xiàn)了一次消化，連續(xù)測定的實(shí)用性，可謂一舉多得。其測定結(jié)果與原國家標(biāo)準(zhǔn)相符，經(jīng)有關(guān)專家鑒定，認(rèn)為該儀器不僅測定速度快，操作簡便，重現(xiàn)性好，度高，而且可提高工作效率2-3倍，節(jié)電60-70%左右，節(jié)約試劑20%左右。對改善分析人員工作環(huán)境，減輕勞動(dòng)強(qiáng)度都有積極作用，是各飼料廠用作日常檢測的理想設(shè)備。

• 工作原理：

H₂SO₄和H₂O₂都是強(qiáng)氧化劑，在高溫下放出新生態(tài)氧（O），使樣品中有機(jī)物分解，放出CO₂、SO₂、NH₃及各種元素，其中CO₂、SO₂釋放到空氣中，NH₃與H₂SO₄結(jié)合成（NH₄）₂，SO₄、P、Ca等各種無機(jī)離子均能固定在消化液中。

粗蛋白質(zhì)測定是硫酸氨在強(qiáng)堿條件下蒸餾，使氨逸出用硼酸吸收后用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定測定氮的含量，乘以換算系數(shù)為粗蛋白含量；

磷的測定是磷在酸的條件下，與礬鉬酸銨作用，形成黃色礬酸絡(luò)合物，在420nm波長下比色其含磷量與吸光度成正比；

鈣的測定是EDTA返滴定法，在待測液中先加入已知量的EDTA標(biāo)準(zhǔn)液，然后調(diào)節(jié)PH值為12-14，以鉻蘭黑R（鈣試劑）為指示劑，并用標(biāo)準(zhǔn)鈣溶液返滴定過量的EDTA，終點(diǎn)由蘭色變成灰紅色，由此計(jì)算鈣含量。

• 技術(shù)指標(biāo)：
  • 測定范圍：適用于糧食、食品、飼料、乳制品及其他農(nóng)副產(chǎn)品中，粗蛋白、磷、鈣含量的測定。
  • 測定樣品：消化樣品一次同時(shí)可消化4個(gè)。
  • 重現(xiàn)性，平行試驗(yàn)結(jié)果：蛋白質(zhì)符合GB9511-85、GB632-85規(guī)定范圍之內(nèi)，磷符合GB6437-86規(guī)定范圍之內(nèi)。鈣符合GB6432-86規(guī)定范圍之內(nèi)。
  • 電源：220V 50Hz
  • 額定功率：消化裝置：1200KW
• 操作說明：
  • 儀器和用具
  • NPCa-02型氮磷鈣測定儀
  • 分析天平：感量0.0001g
  • 實(shí)驗(yàn)用粉碎機(jī)和研缽
  • 分樣篩：孔徑0.45mm（40目）
  • 酸式滴定管：25ml或50ml
  • 錐形瓶：200ml
  • 定容瓶：100ml和1000ml
  • 刻度移液器：10ml
  • 分光光度計(jì)：10mm比色池，可在420nm下測吸光度
  • 容量瓶或具比色管50ml
  • 試劑

2.1 雙氧水：分析純30%

2.2 氫氧化鈉：化學(xué)純40%溶液

2.3 硼酸：分析純2%水溶液

2.4 混合指示劑：0.1%甲基紅、0.5%溴甲酚綠乙醇溶液，二種溶液等體積混合，用棕色瓶貯存于陰涼處。

2.5 鹽酸：分析純0.05mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，4.2ml分析純濃鹽酸注入1000ml蒸餾水中，用碳酸鈉法標(biāo)定。

0.1mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，8.3ml分析純濃鹽酸注入100ml蒸餾水中，用碳酸鈉法標(biāo)定。

2.6 濃硫酸：（GB625-77）含量98%無氮

2.7 釩鉬酸銨顯示劑：

稱取偏釩酸銨（NH₄VO₃）（HG₃--942）分析純1.25g加硝酸化學(xué)純250ml，另取鉬酸銨分析純25g加蒸餾水400ml溶解，在冷卻的條件下，將此溶液倒入上溶液，加蒸餾水定容至1000ml避光保存，如生成沉淀則不能使用。

2.8 標(biāo)準(zhǔn)磷溶液：

將磷酸二氫鉀KH₂PO₄（GB1274）分析純在105℃干燥2h，在干燥器中冷卻后，稱取0.2195g，在1000ml容量瓶中，溶于蒸餾水中加硝酸化學(xué)純3ml，用蒸餾水定容至刻度，配成50ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)磷溶液。

2.9 氫氧化鈉（GB629）分析純配成21%水溶液。

2.10 三乙醇胺：分析純1:1水溶液。

2.11 乙二胺四乙酸二鈉（EDTA二鈉）（GB401）分析純3.7g加蒸餾水溶成1000ml溶液，濃度0.01M。

2.12 鈣指示劑：1g鉻蘭黑R與100gK₂SO₄研細(xì)混勻，貯于棕色瓶內(nèi)。

2.13 鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液：

碳酸鈣（分析純）在105℃干燥4-6h，在干燥器內(nèi)冷卻后稱取0.5g，溶于25ml0.5mol/L鹽酸中煮沸溶解，除去CO₂定容至500ml。該溶液含鈣量為0.4mg/mL，即0.01M濃度。鈣克分子濃度M?？捎孟率接?jì)算：

M = G×0.4/(m * v)

式中：G---稱樣重（g）；

      m---鈣分子量；

      V---體積（升）。

• 樣品制備

取有代表性的樣品，粉碎至40目篩通過，用四分法縮至200g，裝于密封容器中備用

• 操作步驟

4.1 消化

4.1.1 消化前的準(zhǔn)備

將抽氣泵的外螺紋，同水咀的內(nèi)螺紋固定牢，在排氣管的尾端裝上膠管，膠管的另一頭裝在抽氣泵的橫出口處，再在抽氣泵的下端裝上膠管，接通下水道開足水咀（注：出水膠管長度不得超出30cm，并不準(zhǔn)彎曲），使抽氣泵有足夠的吸力。

4.1.2 消化操作

• 稱取0.2-1g試樣（含氮量0.1-160mg以含量定）準(zhǔn)確至0.0001g干凈無損失地轉(zhuǎn)入清洗干凈的100ml定容消化管中，加濃硫酸10ml搖勻。
• 將裝有試樣的定容消化管移在消化管架上，套在裝有密封圈的排氣管上將消化管上將消化管稍加旋轉(zhuǎn)，使連接處保持密封良好，再裝上彈簧夾。
• 手握排氣管，連同裝有試樣的消化管一起移至消化爐上，使消化管在電爐中心位置，消化管底離電爐底10mm左右，接通電源根據(jù)需要開啟開關(guān)將電壓調(diào)至（220V或450℃）消煮20min左右，見H₂SO₄大量冒煙消化液呈醬油色，此時(shí)帶上手套，將排氣管連同消化管一起取出，置于消化管架上，稍加冷卻，打開排氣管上部瓶塞，逐個(gè)向消化管內(nèi)加入雙氧水2-3ml（加雙氧水時(shí)用吸管逐滴加入，切忌在電爐上加雙氧水，以防消化管破裂）后，將電壓調(diào)至（120-150V或300℃），重新轉(zhuǎn)入消化爐煮5min，仍用上法，向消化管內(nèi)滴入雙氧水直至消化液清澈透明，再移入消化爐，繼續(xù)消煮15min（此時(shí)電壓調(diào)回220V或450℃）取出，待消化液冷卻至室溫（冷卻時(shí)排氣管繼續(xù)保持吸氣狀態(tài)，切忌放在冷水中冷卻）再在消化管內(nèi)加入蒸餾水至刻度（100ml），搖勻、待測。

4.2 粗蛋白測定（半微量蒸餾法）

4.3 在定容待測的消化液中，用移液管移出定量的消化液于干凈的消化管內(nèi)，蒸餾參照蛋白質(zhì)測定儀（定氮儀）步驟操作。

4.4 滴定

吸收氮后的吸收液，用標(biāo)定后的鹽酸溶液進(jìn)行滴定，溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛易仙珵榻K點(diǎn)。

4.5 空白測定

用0.1g糖代樣品或不加樣品做空白測定。

4.6測定結(jié)果計(jì)算

 

5 磷的測定

5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

準(zhǔn)確吸取磷標(biāo)準(zhǔn)溶液（52ug/ml）0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、8.0、10.0、12.0、15.0于50ml容量瓶中各加入釩鉬銨顯示劑10ml，用蒸餾水稀釋至刻度搖勻，放置10min以上，以0ml溶液為參比，用10mm比色皿，在420nm波長測各溶液的吸光度用磷含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

5.2 試樣測定

準(zhǔn)確吸取待測消化液2-10ml（視樣品含磷量定，使光密度值不超過標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍）于50ml容量瓶中，以空白消化液作參比按繪制曲線同樣步驟顯色、比色，測得樣品吸光度，由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得樣品含磷量。

5.3測定結(jié)果計(jì)算

 

6．鈣的測定（EDTA）返滴定法

6.1 準(zhǔn)確吸取待測消化液10ml于50ml錐形瓶，加蒸餾水40ml，三乙醇銨2ml，20%氫氧化鈉7.2ml，邊加邊搖中和試樣分解液的酸度，再加20%氫氧化鈉2ml，使溶液的PH值達(dá)12-14，加鈣指示劑0.1g左右，加入0.01MEDTA液10ml，此時(shí)溶液應(yīng)呈藍(lán)綠色（如是紅色，說明分解液中鈣的含量高，還要少吸取樣品）然后用0.01M標(biāo)準(zhǔn)鈣滴定過剩的EDTA，終點(diǎn)由藍(lán)綠色變?yōu)樽霞t色，同時(shí)進(jìn)行空白試樣的測定。

6.2 結(jié)果計(jì)算