品牌:ZCIBIO
產(chǎn)品名稱:植物葉綠素酶(chlorophyllase)ELISA試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:48T(次)/96T(次)
實(shí)驗(yàn)樣本:植物的根莖葉等其他相關(guān)生物樣本
應(yīng)用領(lǐng)域:植物葉綠素酶(chlorophyllase)ELISA試劑盒僅供科研實(shí)驗(yàn),不得用于臨床診斷,使用前請(qǐng)認(rèn)真閱讀說明書
保存條件:2~8℃,有效期6個(gè)月。
標(biāo)準(zhǔn)曲線( Standard Curve)
很多因素都能影響標(biāo)準(zhǔn)曲線的結(jié)果,其中就包括配制和操作。
我是否可以改變標(biāo)準(zhǔn)品的配制?
◆ 不可以。 用指的稀釋液適當(dāng)稀釋的重組標(biāo)準(zhǔn)品如說明書中所示。
◆ 混合和溶解標(biāo)準(zhǔn)品時(shí),應(yīng)避免起泡。
◆ 溶解后的標(biāo)準(zhǔn)品靜置至少15分鐘(根據(jù)說明書)。在使用之前輕輕混勻,保證所有的固體已經(jīng)溶解。
◆ 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí),確保所有的稀釋步驟已經(jīng)準(zhǔn)確完成。稀釋時(shí)注意及時(shí)更換槍頭。在移液之前將稀釋液充分混合。
洗滌方式怎樣影響我的標(biāo)準(zhǔn)曲線?
◆ 不*的洗滌會(huì)降低測(cè)定性,導(dǎo)致不理想的標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果。確保洗板機(jī)的正常工作,確保酶標(biāo)板各孔被充分洗滌卻不干燥。
移液方式怎樣影響我的標(biāo)準(zhǔn)曲線?
◆ 不合理的移液操作會(huì)導(dǎo)致高CV值和不理想曲線。
◆ 在制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的過程中,不正確的移液方式會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的稀釋,從而使錯(cuò)誤的數(shù)值進(jìn)入標(biāo)
準(zhǔn)曲線中,或者產(chǎn)生非線性曲線。確保移液器正常工作。每孔中的液體體積不等可能就是移
液器失靈或者槍頭使用不當(dāng)所致。
3.組織勻漿:
用預(yù)冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.2-7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將組織.剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的 PBS(一般按 1:9 的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對(duì)應(yīng) 9mL 的 PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于 5000×g 離心 5~10 分鐘,取上清檢測(cè)。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清或其他生物標(biāo)本:
請(qǐng) 1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(如檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)蛋白,則對(duì)需要細(xì)胞進(jìn)行破碎處理)。
注意:以上標(biāo)本均需密封保存,4℃保存應(yīng)小于一周,-20℃ 不應(yīng)超過1個(gè)月,-80℃保存可放置更久。
標(biāo)本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫,不應(yīng)加熱使之溶解。
標(biāo)本溶血會(huì)影響最后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
標(biāo)本說明
實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)標(biāo)本含量,如果標(biāo)本濃度過高,應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋,使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性,并注意留存樣本。
使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。
若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等,所以可能存在檢測(cè)不出的情況。
某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因?yàn)楫a(chǎn)品所使用的檢測(cè)抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測(cè)出。
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
此產(chǎn)品提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),上海茁彩生物科技有限公司專注酶聯(lián)免疫,專注ELISA,期待您的來電!
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