詳細介紹
品牌:ZCIBIO
產(chǎn)品名稱:植物脫鎂葉綠素a氧化酶(PAO)ELISA試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:48T(次)/96T(次)
實驗樣本:植物的根莖葉等其他相關(guān)生物樣本
應用領(lǐng)域:植物脫鎂葉綠素a氧化酶(PAO)ELISA試劑盒僅供科研實驗,不得用于臨床診斷,使用前請認真閱讀說明書
保存條件:2~8℃,有效期6個月。
我沒有足量的稀釋液去稀釋所有的樣品,怎么辦?
◆ 試劑盒內(nèi)提供說明書中所指的足量的稀釋液。能保證所有的標準品和樣品檢測兩次。
◆ 如果沒有推薦的稀釋度,或者需要大量稀釋,請在實驗前計算出所需的稀釋液總量,然后聯(lián)
系技術(shù)服務(wù)部門獲取額外的稀釋液。
我能否使用試劑盒內(nèi)非推薦的樣品類型?
◆ 試劑盒內(nèi)說明書中所指的樣品類型是經(jīng)過驗證可行的。其它未推薦的樣品類型是沒有經(jīng)過
任何檢測的。
我使用對照的檢測結(jié)果都在范圍外,為什么?
◆ 如果使用對照,其濃度應該是在某一特定范圍內(nèi)。如果對照值在范圍外,則是無效測定。
◆ 確定對照具有重復性。
標本的采集與保存
1.植物標本的采集及保存
(1)稱取0.1g(誤差±3%以內(nèi))新鮮植物組織樣本,在液氮中充分研磨;
(2)加入1ml的提取液(80%甲醇), 置于-20度過夜;
(3)于4度,8000rpm,離心20分鐘,取上清;
(4)上清液過C-18固相萃取柱。具體步驟是: 80%甲醇(1ml)平衡柱→上樣→收集樣品→移開樣品后用100%甲醇(5ml)洗柱→100%乙(5ml)洗柱→100%甲醇(5ml)洗柱→循環(huán)。過柱后的樣本真空干燥或氮氣吹干,保存?zhèn)溆茫?/span>
(5) 上樣前加入pH7.4 PBS緩沖液(1ml定容)?;靹蚝笫覝胤胖?0分鐘,然后4度離心(8000rpm,15分鐘),取上清并暫時保存于4度待用。
3.組織勻漿:
用預冷的 PBS (0.01mol/L, pH=7.2-7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織.剪碎。將剪碎的組織與對應體積的 PBS(一般按 1:9 的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對應 9mL 的 PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。最后將勻漿液于 5000×g 離心 5~10 分鐘,取上清檢測。
4.細胞培養(yǎng)上清或其他生物標本:
請 1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融(如檢測細胞內(nèi)蛋白,則對需要細胞進行破碎處理)。
注意:以上標本均需密封保存,4℃保存應小于一周,-20℃ 不應超過1個月,-80℃保存可放置更久。
標本使用前應緩慢均衡至室溫,不應加熱使之溶解。
標本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
標本說明
本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預留充足的樣本。
實驗前應預測標本含量,如果標本濃度過高,應對標本進行稀釋,使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。
使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質(zhì)的引入導致ELISA實驗結(jié)果偏差。
若樣本為細胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。
某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
此產(chǎn)品提供免費代測服務(wù),上海茁彩生物科技有限公司專注酶聯(lián)免疫,專注ELISA,期待您的來電!