詳細(xì)介紹
六胺銀染色
染色步驟:1、石蠟切片脫蠟至水。2、重鉻酸鉀溶液浸泡過(guò)夜(需用重鉻酸鉀溶液浸泡過(guò)夜否則細(xì)胞核極易著黑色影響觀察)。3、水洗2min4、1%的高碘酸氧化15~20min(此時(shí)配制工作液,并將工作液放置56℃烤箱預(yù)熱)5、流水沖洗5min,再用蒸餾水洗2次6、切片用阻水筆畫(huà)圈,滴加預(yù)熱的工作液,放入濕盒中加蓋(濕盒中要加入少量水,防止染液在長(zhǎng)時(shí)間加熱時(shí)蒸發(fā)變干)7、40分鐘后要將切片拿出在鏡下觀察(觀察時(shí)工作液不用洗去)腎臟則以腎小球毛細(xì)血管基膜出現(xiàn)黑色為準(zhǔn),如果著色不夠深,則繼續(xù)放入烤箱孵育;肺則以真菌變?yōu)楹谏珵闇?zhǔn)(有的肺組織無(wú)真菌,則以同組有真菌的肺做參考,如果都沒(méi)有真菌則以支氣管變黑為標(biāo)準(zhǔn))。
六胺銀染色以后每隔10分鐘取出切片在鏡下觀察,直至染色結(jié)果滿(mǎn)意為止。8、蒸餾水稍洗9、5%的硫代.硫酸鈉處理5min10、伊紅復(fù)染(在HE染色中的伊紅后面脫水的*缸中染伊紅為佳,伊紅復(fù)染不用染太深)直接在伊紅后面的酒精脫水,透明,封片。染色結(jié)果:腎小球囊基膜、腎毛細(xì)血管球基膜和腎小管上皮基膜呈黑色。真菌、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維也呈灰黑色或棕黑色。 注意事項(xiàng)1、六銨銀儲(chǔ)備液配妥后應(yīng)置于4℃的冰箱內(nèi),一般可以保存6個(gè)月,如果室溫僅可保存2周。六銨銀工作液僅能使用一次;2、腎基膜比真菌等較難顯色,因而在60℃溫箱中作用的時(shí)間也較長(zhǎng);腎小管基膜一般比腎毛細(xì)血管球基膜顯色早,但應(yīng)以后者作為標(biāo)準(zhǔn),腎毛細(xì)血管球基膜呈黑色而背景呈淡棕黃色為宜;3、在低倍鏡檢時(shí),菌體不宜著色太黑,否則在高倍鏡下觀察則不夠清皙透亮,在菌體密集成堆的地方顯色更要適當(dāng);4、切片入六胺銀染色之前必須用蒸餾水浸泡洗滌,不能用自來(lái)水,否則易出現(xiàn)沉淀。染色用滴染法好控制染色并且要求較低,如果用浸染法所有與試劑接觸的玻璃缸必須用蒸餾水清洗干凈。另外浸染法需要的試劑較多而且玻片在顯影液中及易出現(xiàn)銀鏡反應(yīng)使整個(gè)玻片變黑很臟影響美觀并且不易控制顯色。
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