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技術(shù)文章

磷脂酰乙醇胺結(jié)合蛋白4(PEBP4)|ELISA指標(biāo)

閱讀:65          發(fā)布時(shí)間:2024-10-15

基本信息

  • 名稱:磷脂酰乙醇胺結(jié)合蛋白4(Phosphatidylethanolamine-binding protein 4),簡(jiǎn)稱PEBP4。

  • 別名:CORK1、hPEBP4、Cousin-of-RKIP 1 Protein、PEBP-4、UNQ1933/PRO4408等。

  • 種屬:主要存在于人類(Homo sapiens)中,也可能存在于其他物種如大鼠、小鼠等。

  • 蛋白長(zhǎng)度:通常為成熟蛋白的全長(zhǎng)。

  • 表達(dá)區(qū)域:特定的氨基酸序列區(qū)域,如23-227氨基酸序列。

結(jié)構(gòu)與功能

  • 結(jié)構(gòu):PEBP4由特定的氨基酸序列組成,具有特定的空間結(jié)構(gòu),這使得它能夠與磷脂酰乙醇胺等分子結(jié)合并發(fā)揮功能。

  • 功能:PEBP4在生物體內(nèi)可能參與多種生理過(guò)程,如細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、蛋白質(zhì)相互作用等。然而,關(guān)于其具體功能的詳細(xì)研究仍在進(jìn)行中。

ELISA技術(shù)基于抗原-抗體特異性反應(yīng)的原理,通過(guò)一系列的化學(xué)和物理步驟,將待測(cè)樣品中的PEBP4蛋白與相應(yīng)的抗體結(jié)合,并通過(guò)酶的催化作用使底物顯色,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)PEBP4蛋白的定量檢測(cè)。

PEBP4酶聯(lián)免疫檢測(cè)步驟

  1. 準(zhǔn)備試劑:包括已包被PEBP4抗原或抗體的固相載體(如微孔板)、酶標(biāo)記的抗體、底物溶液、洗滌液、終止液等。

  2. 包被:將PEBP4抗原或抗體包被在固相載體上,形成固相抗原或抗體。

  3. 加樣:將待測(cè)樣品加入已包被的固相載體中,使樣品中的PEBP4蛋白與固相抗原或抗體結(jié)合。

  4. 洗滌:去除未結(jié)合的物質(zhì),保留結(jié)合在固相載體上的PEBP4蛋白-抗體復(fù)合物。

  5. 加酶標(biāo)抗體:加入酶標(biāo)記的抗體,與固相載體上的PEBP4蛋白-抗體復(fù)合物結(jié)合,形成酶標(biāo)抗體-PEBP4蛋白-抗體復(fù)合物。

  6. 再次洗滌:去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。

  7. 加底物:加入酶底物,酶催化底物顯色,顏色的深淺與樣品中PEBP4蛋白的含量成正比。

  8. 終止反應(yīng):加入終止液,停止顯色反應(yīng)。

  9. 讀數(shù):用酶標(biāo)儀檢測(cè)各反應(yīng)孔的吸光度值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)樣品中PEBP4蛋白的含量。


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