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葉綠素
    葉綠素含量和光合作用密切相關(guān),是反映藻類生理狀態(tài)的重要指標(biāo)。目前發(fā)現(xiàn)存在于藻類中的葉綠素種類有:葉綠素a、葉綠素b、葉綠素c1、葉綠素c2、葉綠素c3和葉綠素d。所有放氧光合生物均含有葉綠素a,大部分還含有葉綠素b或葉綠素c1、c2和c3,而葉綠素d只在某些紅藻中存在。這些葉綠素均可起捕獲光能的作用。葉綠素a代表綠色的光合作用色素,所有活著的藻類中均有能夠被直接測(cè)定,并用來(lái)作為藻類生物量多寡的主要指示；葉綠素b和葉綠素是一種輔助色素,只存在于一些特殊藻類中,能夠影響葉綠素a測(cè)定的精確性。由于不同的藻類所含有的葉綠素種類不同,而且各種葉綠素在藻類中的比例不同,因此可以通過(guò)測(cè) 各種葉綠素的比值來(lái)確定未知藻類的種屬。 

葉綠素?zé)晒鈨x熒光動(dòng)力學(xué)  

    葉綠素?zé)晒鈩?dòng)力學(xué)包含著光合作用過(guò)程的重要信息，如光能的吸收和轉(zhuǎn)化。能量的傳遞與分配、反應(yīng)中心的狀態(tài)，過(guò)剩能量的耗散以及反映光合作用的光抑制和光破壞。應(yīng)用葉綠素?zé)晒饪梢詫?duì)植物材料進(jìn)行原位、無(wú)損傷的檢測(cè)，且操作步驟簡(jiǎn)單。所以葉綠素?zé)晒庠絹?lái)越受到人們的青睞，在光合生理和逆境生理等研究領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。

葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)原理說(shuō)明 

    葉片是進(jìn)行光合作用的主要器官，葉綠體是進(jìn)行光合作用的主要細(xì)胞器。葉綠體是由葉綠體膜包裹起來(lái)的組織，膜內(nèi)主要含有基質(zhì)、基粒、類囊體。葉綠體的光合色素主要集中在基粒之中，光能轉(zhuǎn)換為化學(xué)能的主要過(guò)程是在基粒中進(jìn)行的。   
    在高等植物體內(nèi)含有光合色素包括葉綠素和類胡蘿卜素兩種，一般情況下以3:1的比例存在于類囊體的膜中。葉綠素分為葉綠素a和葉綠素b,類胡蘿卜素分為胡蘿卜素和葉黃素。    葉綠素不溶于水，而溶于有機(jī)溶劑。從化學(xué)性質(zhì)講，葉綠素是葉綠酸的產(chǎn)物，葉綠酸的兩個(gè)羥基分別被甲醇和葉綠醇酯化而得到的，對(duì)光、熱、酸敏感，能發(fā)生皂化反應(yīng)，性質(zhì)不穩(wěn)定。
    光合作用是高等植物從外界環(huán)境獲取能量的重要途徑，是高等植物進(jìn)行生命活動(dòng)的基礎(chǔ)。由綠色植物發(fā)射的葉綠素?zé)晒庖砸环N復(fù)雜的方式表達(dá)光合作用活性和行為。當(dāng)光子照射綠色植物的葉片時(shí)，光能在葉片的分配有反射、透射和吸收等三種主要的去激途徑。葉綠素分子吸收的光能除了大部分進(jìn)行光化學(xué)反應(yīng)外，少部分會(huì)以熱耗散和熒光的方式釋放出來(lái)。
    在植物光合作用過(guò)程中，葉綠素色素分子對(duì)光能的吸收及能量的轉(zhuǎn)變途徑中包括著極復(fù)雜的生物物理及生物化學(xué)過(guò)程。在葉綠體內(nèi)激發(fā)能從葉綠素b向葉綠素a的傳遞效率幾乎達(dá)到100%,所以檢測(cè)不到葉綠素b的熒光，因此，在對(duì)葉綠素?zé)晒膺M(jìn)行分析時(shí)，通常是指葉綠素a發(fā)出的熒光，光合作用過(guò)程中有兩種不同的光化學(xué)反應(yīng)，他們發(fā)生在相關(guān)聯(lián)的不同色素基團(tuán)中，這些基團(tuán)被稱為PSI和PSII。在常溫下，PSI色素系統(tǒng)基本不發(fā)熒光，接近95%的被檢測(cè)到的，葉綠素?zé)晒庑盘?hào)來(lái)源于PSII相關(guān)的葉綠素分子，因此，我們研究的葉綠素?zé)晒夤庾V主要由PSII相關(guān)葉綠素分子產(chǎn)生的。

葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)產(chǎn)品特點(diǎn)

    全自動(dòng)開合葉室，程序控制葉室閉合進(jìn)行暗適應(yīng)測(cè)量，測(cè)量ΦII, FV/FM, PAR和溫度，快門實(shí)現(xiàn)葉綠素?zé)晒庹T導(dǎo)曲線、NPQ弛豫和RLC（快速光曲線），無(wú)人值守自動(dòng)監(jiān)測(cè)，自動(dòng)增益和自動(dòng)歸零功能：自動(dòng)在野外進(jìn)行正確設(shè)置，數(shù)據(jù)采集器可同時(shí)操作多個(gè)傳感器，簡(jiǎn)單開關(guān)啟動(dòng)水下或陸地測(cè)量程序，全防水可達(dá)50m，潛水堅(jiān)固不銹鋼或工程塑料設(shè)計(jì)，擴(kuò)展大型外殼與電池包，利用易用軟件選擇所供程序或設(shè)定程序，根據(jù)程序，可自動(dòng)運(yùn)行達(dá)72h，開合型傳感器可通過(guò)電腦控制，用于預(yù)田間實(shí)驗(yàn)，增加數(shù)采可以擴(kuò)展到多個(gè)傳感器（同時(shí)測(cè)量可達(dá)15個(gè)）。

葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)在藻類中的應(yīng)用參數(shù)

    Fo, Fm, Fv/Fm, F, Fm’, Fo’, ΔF/Fm’, qP, qL, qN, NPQ, Y(NO), Y(NPQ), rETR, PAR, T等。

    多輪飽和脈沖調(diào)制熒光(PAM)

    激發(fā)光： 470 nm，小于1 umol m2 s-1

    光化光 ：白 LED，zui大光強(qiáng)3300 umol m2 s-1

    飽和脈沖：白光LED，zui大光強(qiáng)7800 umol m2 s-1

    PSI 激發(fā)光：遠(yuǎn)紅光735 nm，zui大光強(qiáng)40 umol m2 s-1

    PAR 傳感器: 余弦校正2Φ傳感器400-700 nm

    溫度傳感器: 分辨率±0.1 °C，量程 -5~ +40 °C

    操作溫度: 0 °C ~45 °C

    儲(chǔ)存溫度: -5 °C~60°C

    潛入 50 m深或5bar

    電源: 16.8V 4.5Ah，可充電NiMH電池包

葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)在藻類中的應(yīng)用 

    藻類細(xì)胞內(nèi)的葉綠素分子通過(guò)直接吸收光量子和間接通過(guò)捕光色素吸收光量子得到能量后,從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài),并產(chǎn)生熒光。
    1、葉綠素a是綠色的光合作用色素,是衡量藻類生物量的主要標(biāo)志,是一種其濃度能被熒光儀定的熒光分子。光線的變化、溫度、度、可溶物質(zhì)和藻類健康狀況均對(duì)熒光有顯著影響,從而影響葉綠素a濃度的確定。
    2、光線的影響，光線的變化對(duì)藻細(xì)胞中的熒光有顯著的影響。在光線較低的時(shí)候,藻細(xì)胞會(huì)將葉綠體退到細(xì)胞的外圍以獲得更多的光線,或者產(chǎn)生更多的葉綠體。這2種反應(yīng)會(huì)導(dǎo)致不實(shí)的熒光數(shù)據(jù),而不能代表實(shí)際的藻類生物量。而當(dāng)光線太強(qiáng)時(shí),藻類的生長(zhǎng)會(huì)受到抑制而導(dǎo)致熒光低估了藻類的生物量。
    3、溫度的影響，所有的熒光都不同程度的受溫度影響,溫度與熒光成反比。
    4、水質(zhì)的影響，可溶解物質(zhì)，葉綠素的降解產(chǎn)物、輔助色素和濁度均會(huì)影響熒光。
    5、藻細(xì)胞的生理狀態(tài)的影響，被藻細(xì)胞中包含的葉綠素吸收的光能有3種去向；被用于光合作用；產(chǎn)生熱；以熒光形式重新發(fā)射。由于“健康”的藻細(xì)胞所吸收的光能可以充分地用于光合 作用,因而發(fā)射的熒光就比“垂死”的藻細(xì)胞少。 

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