利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)ELISA試劑盒
僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!
本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人利什曼原蟲抗體（Leishimaria Ab）的含量。
有效期：6個月
保存條件：2-8℃

[實驗原理]

試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被人利什曼原蟲抗體（Leishimaria Ab）捕獲抗原的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人利什曼原蟲抗體（Leishimaria Ab）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

[樣本處理及要求]

1.  血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.  組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織*碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注：標(biāo)本溶血會影響檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。

[需要而未提供的試劑和器材]

1.酶標(biāo)儀（450nm）

2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒溫箱

4.蒸餾水或去離子水

[試劑盒組成]

利什曼原蟲，一種微小的鞭毛蟲，在動質(zhì)體目錐體蟲科動物中占據(jù)著特殊的地位。這種原蟲主要寄生于哺乳動物、爬行類等動物體內(nèi)，給宿主帶來一系列健康問題。在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，利什曼原蟲引發(fā)的疾病統(tǒng)稱為利什曼病，其分布廣泛，影響深遠(yuǎn)。

利什曼原蟲的種類繁多，其中寄生于人體的主要有三種，其中杜氏利什曼原蟲的危害尤為嚴(yán)重。這種原蟲主要寄生于人體的肝、脾、淋巴腺等細(xì)胞之內(nèi)，通過其微小的鞭毛在細(xì)胞內(nèi)移動并繁殖。當(dāng)人體被感染后，會引發(fā)黑熱病，這是一種嚴(yán)重的疾病，患者會出現(xiàn)發(fā)熱、肝脾腫大、貧血等癥狀。如果不及時治療，死亡率高達(dá)90%以上，是我國五大寄生蟲病之一。

利什曼病的傳播主要依賴于特定的媒介，如白蛉子。這些吸血的小昆蟲在吸食了帶有利什曼原蟲的動物血液后，原蟲會在其體內(nèi)繁殖形成細(xì)滴蟲。當(dāng)白蛉子再次吸食人血時，細(xì)滴蟲就會被接種到人體內(nèi)，使人感染。此外，病犬也是利什曼病的重要傳播源，因此，在疫區(qū)，消滅病狗也是預(yù)防利什曼病的重要手段之一。

利什曼病在全球范圍內(nèi)的分布廣泛，主要流行于非洲、亞洲、歐洲南部和南美洲等地。在我國，皮膚利什曼病最早發(fā)現(xiàn)于20世紀(jì)80年代，新疆和中國臺灣*病例報道，患者以青壯年為多。隨著全球化的推進(jìn)和氣候變化的影響，利什曼病的傳播范圍也在不斷擴(kuò)大，對全球公共衛(wèi)生構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。

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