血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b酶聯(lián)免疫診斷試劑

廣州健侖生物科技有限公司

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血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b酶聯(lián)免疫診斷試劑

試劑盒規(guī)格：96T/盒

試劑盒用途

• 5b(TRACP-5b)的含量
• ELISA）。將標準品、待測樣本加入到預先包被抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)透明酶標包被板中，溫育足夠時間后，洗滌除去未結合的成分，再加入酶標工作液，溫育足夠時間后，洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根過氧化物酶（HRP）催化下轉化為藍色產(chǎn)物，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)濃度呈正相關，450nm波長下測定OD值，根據(jù)標準品和樣品的OD值，計算樣本中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)含量。
• 200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml
• 5b(TRACP-5b)ELISA檢測試劑盒需要而未提供的試劑和器材】
• 、37℃恒溫箱
• 5b(TRACP-5b)ELISA檢測試劑盒操作步驟】
• 、準備：從冰箱取出試劑盒，室溫復溫平衡30分鐘。
• 、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
• 、加標準品和待測樣本：取足夠數(shù)量的酶標包被板，固定于框架上，分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標準品孔中加入標準品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；空白對照孔不加。
• 、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
• 、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4次（也可用洗板機按說明書操作洗板）。
• 、加酶標工作液：每孔加入酶標工作液50μL，空白對照孔不加。
• 、溫育：重復4的操作。
• 、洗板：重復5的操作。
• 、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，37℃避光顯色15min。
• 、終止：取出酶標板，每孔加終止液50μL，終止反應（顏色由藍色立轉黃色）。
• 、測定：以空白孔調零，在終止后15分鐘內，用450nm波長測量各孔的吸光值（OD值）。
• 、計算：根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值，計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應的樣品濃度，也可以使用各種應用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。
•  
• 、樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因為疊氮鈉（NaN3）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑。
• 、標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
• 、樣本應充分離心，不得有溶血及顆粒。
•  
• 、實驗嚴格按照說明書的操作進行，實驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
• 、酶標包被板開封后如未用完，應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
• 、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。
• 、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍，計算結果乘以5才是樣本實際濃度。
• 、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml，超過此范圍，為標準曲線延伸計算所得，不做為準確定量結果，請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果（0.1-200ng/ml范圍內），乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。
• 、若顯色過淺，可適當延長底物溫育時間。
• 、為避免交叉污染，標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭；酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復使用封板膜。
• 、試劑盒保質期內使用，不同批號的試劑不得混用。
• 、底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。
• 37℃反應30分鐘
• 4次，加入酶標試劑，37℃反應30分鐘
• 4次，加入顯色液A、B，37℃顯色15分鐘

1. 分鐘之內讀OD值

我司還提供其它進口或國產(chǎn)試劑盒：登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌、化妝品檢測、食品安全檢測等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。

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