詳細(xì)介紹
肌肉特異性受體酪氨酸激酶自身抗體放免法(MuSK Ab RIA)檢測試劑用于定量檢測人血清中MuSK 自身抗體(Ab),僅供專業(yè)技術(shù)人員操作使用。
在乙酰膽堿受體抗體(Acetylcholine receptor antibody, AChRAb)呈陰性的重癥肌無力(Myasthenia Gravis, MG)患者的血清中,存在可檢測的肌肉特異性受體酪氨酸激酶自身抗體(Muscle-specific receptor tyrosine kinase antibody MuSK Ab),這些抗體的檢測在重癥肌無力疾病診斷及治療中具有重要的價(jià)值。
RSR MuSK自身抗體檢測試劑盒采用放射免疫法檢測患者血清中MuSK自身抗體。
【檢測原理】
在MuSK Ab 放免法檢測中, 作為抗原的MuSK 蛋白,被表達(dá)純化后,用放射性同位素125I 標(biāo)記?;颊哐寮皩φ罩蠱uSK 抗體與125I-MuSK 相結(jié)合,室溫孵育18 小時(shí)后,抗原抗體復(fù)合物與抗人免疫球蛋白G(IgG) 抗體形成免疫沉淀, 2-8℃孵育2小時(shí)后,加入洗液并離心, 吸取上清液以除去未結(jié)合的標(biāo)記蛋白。經(jīng)過γ計(jì)數(shù),試管內(nèi)免疫沉淀物的放射量與樣本抗體水平相對應(yīng),即沉淀物的放射計(jì)數(shù)越高,MuSK抗體的濃度越高。
【簡單實(shí)驗(yàn)步驟】
使用前所有試劑組分需室溫放置(20-25℃)至少30分鐘 | |
加樣: | 5μL未稀釋的患者血清(或50μL稀釋的患者血清),50μLMuSK抗體陰性以及陽性血清 (直接使用,無需稀釋) 。一式兩份。 |
加樣: | 每管50μL 125I- MuSK |
試管: | 蓋好試管,使用旋渦混合器輕輕混勻。 |
孵育: | 室溫下18小時(shí) |
加樣: | 每管50μL抗人IgG抗體 |
試管: | 蓋好試管,使用旋渦混合器輕輕混勻。 |
孵育: | 2-8oC, 2小時(shí) |
加樣: | 每管25μL充分混勻的沉淀增強(qiáng)劑 |
加樣: | 每管加1mL洗液 |
試管: | 使用旋渦混合器輕輕混勻 |
試管: | 4℃下1500g離心20分鐘 |
試管: | 棄去上清液 |
加樣: | 每管加1mL洗液 |
試管: | 使用旋渦混合器重新溶解沉淀 |
試管: | 4℃下1500g離心20分鐘 |
試管: | 棄去上清液 |
使用γ射線計(jì)數(shù)儀對每管計(jì)數(shù)120秒 |
試劑盒特點(diǎn)
•可靠便捷,同時(shí)檢測胎兒型和成人型AChRAb
•靈敏度:*,于53例重癥肌無力病的患者血清樣本。
•特異性:98%, 于112例健康志愿者的血清。
•標(biāo)準(zhǔn)品范圍:0.25 – 8 nmol/L
•臨界值:陰性: < 0.5 nmol/L; 陽性: ≥ 0.5 nmol/L
•低檢測限:0.02 nmol/L
適用范圍:RSR公司已加入英國NEQAS(英國質(zhì)量評估體系),本產(chǎn)品可用于評價(jià)其他方法準(zhǔn)確性 。
適用儀器:α計(jì)數(shù)器
樣本要求:5微升人血清,避免使用脂血、溶血及血漿樣本。
試劑盒規(guī)格:25測試,50測試,100測試。
儲存條件:2-8ºC保存。