詳細(xì)介紹
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。僅供科研實驗。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
人丙酮酸脫氫酶E2ELISA試劑盒 | PDH-E2 ELISA Kit | 48T/96T |
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
相關(guān)產(chǎn)品:
人β-防御素4(β-DF4)ELISA試劑盒 0.312-20 ng/mL
人二甲基精二甲胺水解酶1(DDAH1)ELISA試劑盒 0.156-10 mIU/mL
人防御素β103A(DEFβ103A)ELISA試劑盒 78-5000 pg/mL
人Dicer酶1ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL
樣品準(zhǔn)備:
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
三 100g Trichloroacetic Acid 4℃保存
N- 三 ( 羥甲基 ) 甲基甘 10g TRICINE(N-Tris[Hydroxymethyl]Methylglycine) 室溫干燥保存
2,3,5 氯化三苯基四氮唑 1g 2,3,5-Triphenyl-2H-Tetrazolium Chloride(TTC) 室溫干燥避光保存
三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷 100g TRIS(Tris(Hydroxymethyl)Aminomethane) 室溫干燥保存
三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷鹽酸鹽 100g TRIS-HCl(Tris(Hydroxymethyl)Aminomethane Hydrochloride) 室溫干燥保存
曲拉通 X-100 100mL Triton X-100 室溫保存
曲拉通 X-114 100mL Triton X-114 室溫保存
臺盼藍(lán) 5g Trypan Blue 室溫干燥保存
胰 1:250 25g Trypsin 1:250 Porcine Pancreas 4℃保存
胰抑制劑 100m Trypsin Inhibitor -20℃保存
人丙酮酸脫氫酶E2ELISA試劑盒COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細(xì)胞HGC-27(人胃細(xì)胞)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis
地衣芽胞桿菌 Bacillus licheniformis苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞培養(yǎng)基人羊膜上皮細(xì)胞
唾液桿菌水楊素亞種 Lactobacillus salivarius subsp. salicinius人淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基
菊糖芽胞桿菌 Sporolactobacillus inulinus粘紅酵母膠粘變種 Rhodotorula glutinis var. glutinis
BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細(xì)胞)斯氏假單胞菌 Pseudomonas stutzeri
動物雙歧桿菌 Bifidobacterium animalisFC33(人胚胎腎細(xì)胞(Asp-2基因修飾))
根瘤菌 Rhizobium sp.酒假絲酵母 Candida kefyr
ST(豬睪細(xì)胞)豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum