詳細(xì)介紹
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱(chēng)為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。僅供科研實(shí)驗(yàn)。
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
相關(guān)產(chǎn)品:
人富含半胱型酸性蛋白(SPARC)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒
大鼠端粒酶(TE)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒
豬基質(zhì)金屬9(MMP-9)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒
人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒
樣品準(zhǔn)備:
1)血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
Mouse Anti-Bov IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗牛IgG 規(guī)格: 0.1mlDCAF13 DCAF13蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
CCDC125 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白125抗體 規(guī)格: 0.2mlWnt8b WNT蛋白家族Wnt8b抗體 規(guī)格: 0.2ml
Lpin1 protein Lpin1 抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Biotin/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗抗體IgG 規(guī)格: 0.1ml
IRS P53 胰島素受體底物p53蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
EML4/C2orf180 限制過(guò)度增相關(guān)蛋白EML4抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/FITC FITC標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlDPF2/D4 zinc and double PHD fingers family 2 雙PHD-D4鋅指蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
PPAR alpha α型-過(guò)氧化酶活化增生受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
FLCN/BHD/Folliculin 卵巢濾泡激素抗體(BHD綜合征) 規(guī)格: 0.1ml
Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml
小鼠結(jié)核菌素IgG抗體ELISA試劑盒促胰液素/分泌素受體 Secretin Receptor
纖溶抑制因子 Human Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor
甲狀腺素自身抗體 Thyroid Hormone Autoantibody
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165 vascuiar endothelial growth factor 165
腎上腺髓質(zhì)素 adrenomedulin
抗胰 Human α1 Antitrypsinα1
淀粉樣前體蛋白 Human Amyloid Precursor Protein
載脂蛋白A2 Apolipoprotein A2
骨形成蛋白10 Bone Morphogenetic Protein 10
克拉拉細(xì)胞分泌蛋白 Clara cell secreted protein