詳細(xì)介紹
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
服務(wù):
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測試劑盒,有效控制檢測試劑成本。并可提供免費(fèi)代測。僅供科研實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
人T淋巴細(xì)胞亞群ELISA試劑盒 | CD3,CD4, CD8 ELISA Kit | 48T/96T |
試劑盒組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
相關(guān)產(chǎn)品:
人雙氧化酶2(DUOX2) ELISA試劑盒 7.8-500 pg/mL
人二氫還原酶(Dihydrofolate reductase)ELISA試劑盒 1.56-100 U/L
人DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子3(DDIT-3)ELISA試劑盒 0.312-20 ng/mL
人Dickkopf 相關(guān)蛋白2(Dickkopf-2)ELISA試劑盒 0.312-20 ng/mL
樣品準(zhǔn)備:
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
聚乙二醇 8000 250g PEG8000 室溫保存
G 鉀鹽 1Mu Penicillin G K Salt 室溫干燥保存
G 鈉鹽 1g Penicillin G Sodium Salt 室溫保存
戊鈉 5g Pentobarbital Sodium Salt 室溫保存
胃 1:10000 10g Pepsin 1:10000 室溫保存
胃 1:3000 5g Pepsin 1:3000 4℃保存
胃抑制劑 5mg Pepstatin A 4℃保存
牛肉蛋白胨 500g Peptone Beef 室溫保存
蛋白胨 250g Peptone 室溫保存
辣根過氧化物酶 10mg Peroxidase Horseradish(POD) 4℃保存
人T淋巴細(xì)胞亞群ELISA試劑盒大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基吳茱萸次堿
屎腸球菌 Enterococcus faeciumGC-1, 鼠原細(xì)胞
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae煙曲霉 Aspergillus fumigatus
疣孢漆斑菌 Myrothecium verrucaria大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
人海馬神經(jīng)元Lec1(倉鼠卵巢細(xì)胞)
ACHN, 人腎細(xì)胞腺細(xì)胞泡盛曲霉 Aspergillus awamori
鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus谷棒桿菌 Corynebacterium glutamicum
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensisHCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝細(xì)胞)
TT(人甲狀腺導(dǎo)管細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
斜臥青霉 Penicillium decumbens黑曲霉 Aspergillus niger