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由于教學(xué)實(shí)驗(yàn)各時(shí)期使用的真菌微生物菌種在數(shù)量及種類上不盡相同，所以與其相適應(yīng)的培養(yǎng)方法與保管方式亦不相同。大體上分為定期傳代保存法、超低溫凍結(jié)保存法兩種。

1、 定期傳代保存法

(1)液體培養(yǎng)基保存法：單細(xì)胞真菌接種于RPMI 1640培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)24 h，取出后置4℃冰箱保存。該方法用于學(xué)期初低溫凍結(jié)菌種的復(fù)蘇、增菌培養(yǎng)。

(2)瓊脂平板培養(yǎng)基保存法：學(xué)期開始，多細(xì)胞凍結(jié)菌種解凍后，劃線接種于察氏平板培養(yǎng)基上面，28℃培養(yǎng)7～8 d，再將培養(yǎng)菌絡(luò)移種于改良馬丁平板培養(yǎng)基上，28℃培養(yǎng)7 d，待培養(yǎng)菌絡(luò)生長良好,置4℃冰箱保存。為多細(xì)胞真菌的復(fù)蘇與鑒定試驗(yàn)。

(3)瓊脂斜面培養(yǎng)基保存法：單細(xì)胞真菌由液體培養(yǎng)基中多細(xì)胞真菌從馬丁培養(yǎng)基表面，分別挑取菌種菌絡(luò)，蜿蜒化線接種于各自相對應(yīng)的瓊脂斜面培養(yǎng)基中,經(jīng)37℃或28℃培養(yǎng)生長良好后，置4℃冰箱保存?zhèn)溆谩Ｔ摲椒ㄓ糜趯W(xué)期中，真菌菌種即將使用，實(shí)驗(yàn)課前的菌種純化和制備階段。

(4)液體石蠟覆蓋保存法：將無菌液體石蠟油覆蓋于菌絡(luò)生長良好的瓊脂斜面真菌培養(yǎng)物表面，厚度約1 cm左右，置4℃冰箱保存。該法用于學(xué)期末對真菌菌種較長時(shí)期的保存方法。

2、 液氮超低溫凍結(jié)保存法

將單細(xì)胞或多細(xì)胞真菌培養(yǎng)物,以無菌生理鹽水洗下并計(jì)數(shù)，加入等量脫脂牛奶保護(hù)劑，分裝進(jìn)安瓿后封口。選擇菌種不同的適宜冷卻速度，使瓿內(nèi)菌懸液急速或慢速凍結(jié)成冰。置液氮超低溫下保存。

各菌種保存方法結(jié)果分析：

(1)液體培養(yǎng)基保存法，可保存單細(xì)胞真菌15 d左右。

(2)瓊脂平板培養(yǎng)基保存法，保存多細(xì)胞真菌15 d。

(3)瓊脂斜面培養(yǎng)基保存法，保存單細(xì)胞、多細(xì)胞真菌1個(gè)月。

(4)液體石蠟覆蓋保存法，可保存真菌菌種6個(gè)月。

(5)液氮超低溫凍結(jié)保存法 可保存凍結(jié)菌種1年。

一般認(rèn)為，傳代移種保存法保存的微生物菌種，易失去病原性，而超低溫保存法能夠完整的保存菌種的致病性。為此，我們針對實(shí)驗(yàn)的初、中、末3個(gè)時(shí)期，對菌種的保存選擇不同的保存方法，優(yōu)化了菌種的遺傳特性不變性。
 anti-HAV     人抗甲型肝炎病毒IgG抗體     規(guī)格：    48T/96T
 EMA IgA     人抗肌內(nèi)膜抗體IgA     規(guī)格：    48T/96T
 TTN     人抗肌聯(lián)蛋白抗體     規(guī)格：    48T/96T
 AAA     人抗肌動蛋白抗體     規(guī)格：    48T/96T
 CCP     人抗環(huán)胍氨酸肽抗體     規(guī)格：    48T/96T
 RSV     人抗呼吸道合胞病毒抗體     規(guī)格：    48T/96T
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