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微生物菌種的衰退和預(yù)防措施

閱讀:963          發(fā)布時間:2017-5-12

微生物菌種在培養(yǎng)或保藏過程中,由于自發(fā)突變的存在,出現(xiàn)某些原有優(yōu)良性狀的劣化、遺傳標記的丟失等現(xiàn)象,稱為菌種衰退。菌種衰退不是突然發(fā)生的,而是從量變到質(zhì)變的逐步演變過程。菌種衰退的主要原因是有關(guān)基因的負突變。合理的育種、選用合適的培養(yǎng)基、創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件、采用有效的菌種保藏方法等可以有效的防止菌種的退化。常用的菌種保藏方法有斜面低溫保藏法、液體石蠟保藏法、濾紙保藏法、沙土保藏法、液氮冷凍保藏法、冷凍干燥保藏法。

菌種衰退不是突然發(fā)生的,而是從量變到質(zhì)變的逐步演變過程。開始時,在群體細胞中僅有個別細胞發(fā)生自發(fā)突變(一般均為負變),不會使群體菌株性能發(fā)生改變。經(jīng)過連續(xù)傳代,群體中的負變個體達到一定數(shù)量,發(fā)展成為優(yōu)勢群體,從而使整個群體表現(xiàn)為嚴重的衰退。

預(yù)防措施

合理的育種

微生物菌種選育菌種時所處理的細胞應(yīng)使用單核的,避免使用多核細胞;合理選擇誘變劑的種類和劑量或增加突變位點,以減少分離回復(fù);在誘變處理后進行充分的后培養(yǎng)及分離純化,以保證保藏菌種純碎。這些可有效的防止菌種的退化。

選用合適的培養(yǎng)基

有人發(fā)現(xiàn)用老苜蓿根汁培養(yǎng)基培養(yǎng)"5406"抗生菌--細黃鏈霉菌可以防止它的退化。在赤霉菌產(chǎn)生菌--藤倉赤霉的培養(yǎng)基中,加入糖蜜、天門冬素、谷氨酰胺、5-核苷酸或甘露醇等物質(zhì)時,也有防止菌種退化的效果。也有選取營養(yǎng)相對貧乏的培養(yǎng)基做菌種保藏培養(yǎng)基,如培養(yǎng)基中適當限制容易利用的糖源葡萄糖等的添加,因為變異多半是通過菌株的生長繁殖而產(chǎn)生的,當培養(yǎng)基營養(yǎng)豐富時,菌株會處于旺盛的生長狀態(tài),代謝水平較高,為變異提供了良好的條件,大大提高了菌株的退化幾率。

創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件

在實踐中,創(chuàng)造和發(fā)現(xiàn)一個適合原種生長的條件可以防止菌種退化,如低溫、干燥、缺氧等。在棲土曲霉3.942 的培養(yǎng)中,有人曾用改變培養(yǎng)溫度的措施(從20-30℃提高到33-34℃)來防止它產(chǎn)孢子能力的退化。

控制傳代次數(shù)

由于微生物存在著自發(fā)突變,而突變都是在繁殖過程中發(fā)生而表現(xiàn)出來的。所以應(yīng)盡量避免不必要的移種和傳代,把必要的傳代降低到zui低水平,以降低自發(fā)突發(fā)的機率。菌種傳代次數(shù)越多,產(chǎn)生突變的幾率就越高,因而菌種發(fā)生退化的機會就越多。這要求不論在實驗室還是在實踐上,必須嚴格控制菌種的移種傳代次數(shù),并根據(jù)菌種保藏方法的不同,確立恰當?shù)囊品N傳代的時間間隔。如同時采用斜面保藏和其它的保藏方式(真空凍干保藏、砂土管、液氮保藏等),以延長微生物菌種保藏時間。

 

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