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細(xì)菌專用蛋白酶抑制劑混合液實驗步驟
閱讀:234 發(fā)布時間:2022-3-1細(xì)菌專用蛋白酶抑制劑混合液實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
內(nèi)皮細(xì)胞分化G蛋白偶聯(lián)受體8抗體
神經(jīng)細(xì)胞鳥苷酸置換因子NGEF抗體
磷酸化真核啟動因子2α抗體
長鏈脂肪酸延長酶ELOVL2抗體
長鏈脂肪酸延長酶長ELOVL5抗體
有脊椎動物腦發(fā)育相關(guān)蛋白Emx1抗體
外胚層神經(jīng)皮層蛋白1抗體
烯醇化酶超家族成員1抗體
核苷酸內(nèi)焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體
內(nèi)皮細(xì)胞活化蛋白受體抗體
效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體1抗體
早期內(nèi)吞體相關(guān)蛋白1抗體
胞吞調(diào)控蛋白Eps15抗體
真核翻譯起始因子4E抗體
核輸出蛋白5抗體
腸致病性大腸桿菌抗體
E4F轉(zhuǎn)錄因子1抗體
睪酮調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)和腫瘤抑制基因抗體
聚合酶延伸因子2抗體
聚合酶延伸因子抗體
神經(jīng)生長因子調(diào)控抑制蛋白抗體
內(nèi)皮細(xì)胞分化鞘脂G蛋白偶聯(lián)受體1抗體
紅細(xì)胞分化相關(guān)因子1抗體
微管相關(guān)蛋白樣蛋白3抗體
內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體
雌激素受體β抗體