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技術(shù)文章

磺胺二甲嘧啶檢測試劑盒樣本前處理步驟

閱讀:203          發(fā)布時(shí)間:2021-3-11

磺胺二甲嘧啶檢測試劑盒樣本前處理步驟:

注:樣本處理前須知

處理任何樣本時(shí),都必須注意:

(a)實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。

(b)實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,必要時(shí)可對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。樣本前處理需配制:

配液1:衍生化試劑15.1mg2-硝基苯j(luò)ia醛

加甲醇10ml溶解(濃度為10mM)。

配液2:用去離子水將2×濃縮復(fù)溶液按1:1稀釋(1份濃縮復(fù)溶液+1份去離子水)用于抗體稀釋和樣本的復(fù)溶。

配液3:0.1MK2HPO422.8gK2HPO4?3H2O

加去離子水溶解定容至1L。

配液4:1MHCl8.3ml濃HCl

用去離子水定容至100ml。

配液5:1MNaOH4gNaOH

用去離子水溶解定容至100ml。

(a)水產(chǎn)樣本前處理

┅┅用均質(zhì)器均質(zhì)樣本;

┅┅取1±0.05g的均質(zhì)物(魚/蝦),分別加入4ml的蒸餾水,0.5ml1MHCL和100ml衍生化試劑,充分振蕩;

┅┅在37oC過夜孵育(大約16h);

┅┅分別加入5ml0.1MK2HPO4,0.4ml1MNaOH和5ml乙酸乙酯,劇烈振蕩30s;

┅┅在室溫下(20-25oC/68-77℉)3000g以上離心10min;

┅┅取出2.5ml乙酸乙酯到另一個(gè)容器中50oC下氮?dú)獯蹈苫蛐D(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干;

┅┅用1ml正己烷(或正庚烷)溶解干燥物,用1ml已稀釋好的復(fù)溶液充分混合;

┅┅在室溫下(20-25oC/68-77℉)3000g以上離心10min;

┅┅取50ml下層液體用于分析。

樣本稀釋倍數(shù):2

注:樣本應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光處并且需要冷藏保存。

 

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