背景資料:DUX4 is a homeodomain protein with a similar protein sequence to Pax3 and Pax7. Defects in DUX4 may be the cause of facioscapulohumeral muscular dystrophy (FSHD). FSHD is characterized by weakness of the muscles of the face, upper-arm and shoulder girdle. Severity is highly variable. Weakness is slowly progressive and about 20% of affected individuals eventually require a wheelchair. Approximately 70-90% of individuals have inherited the disease-causing deletion from a parent, and approximately 10-30% of affected individuals have FSHD as the result of a de novo deletion. Offsprings of an affected individual have a 50% chance of inheriting the deletion.
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
DUX4抗體 | 50ul 100ul 200ul | Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. |
產(chǎn)品分類:抗體 / 一抗
英文名稱:DUX4
中文名稱 雙同源框蛋白4抗體
英文別名 Double homeobox protein 10; Double homeobox protein 4; Double homeobox protein 4/10; DUX10; DUX4_HUMAN.
交叉反應(yīng):Human
標(biāo)記: Unconjugated
抗體來(lái)源: Rabbit
抗體類型: Polyclonal
免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DUX4
蛋白細(xì)胞定位: 細(xì)胞核
純化方法: affinity purified by Protein A
亞型 IgG
性狀: Liquid
濃度: 1mg/ml
儲(chǔ)存液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件: Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one y
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。
相關(guān)產(chǎn)品:
磷酸化抑癌蛋白EZH2抗體 Anti-phospho-EZH2 100ul
通道多聚體結(jié)構(gòu)域KCTD18抗體 Anti-KCTD18 100ul
KLF樣轉(zhuǎn)錄因子7抗體 Anti-KLF7 100ul
電壓門(mén)控通道蛋白1抗體 Anti-KCNAB1 100ul
G蛋白激活內(nèi)向通道5抗體 Anti-KCNJ5 100ul
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
標(biāo)記法:
直接標(biāo)記法 | 間接標(biāo)記法 |
抗體的準(zhǔn)備:取提純的Ig溶液測(cè)定蛋白質(zhì)含量,置于三角燒瓶中加入生理鹽水和0.5mol/L pH9.5碳酸鹽緩沖液,冰槽中攪拌5~10min; 熒光素的準(zhǔn)備:按每毫克蛋白質(zhì)加0.01~0.02mg的FITC計(jì)算,準(zhǔn)確稱取后加入抗體溶液中; 標(biāo)記:邊攪拌邊加入熒光素,避免粉末黏附于壁上,置于4℃冰箱或冰庫(kù)繼續(xù)攪拌12~18h; 透析:結(jié)合完畢后,先將結(jié)合物以3000r/min離心20min,除去少量沉淀物后裝入透析袋中再置于pH8.0緩沖鹽的燒杯中透析過(guò)夜; 過(guò)柱:取透析過(guò)夜的標(biāo)記物,過(guò)葡聚糖凝膠G-25或G-50柱,分離游 | 抗體的準(zhǔn)備:0~4℃下,用0.01mol/L pH8.0 PBS將待標(biāo)記的抗體蛋白溶液稀釋到濃度為30~40mg/ml,置于三角燒瓶?jī)?nèi)放入冰槽中; 熒光素的準(zhǔn)備:按每毫克蛋白質(zhì)加入0.01mg的熒光素稱取,溶解于等量的3%重碳酸鈉水溶液中;將抗體蛋白溶液與FITC溶液等量混合,在0~4℃中攪拌18~24h,充分?jǐn)噭颍?span> 透析或過(guò)柱層析。 |
實(shí)驗(yàn)步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,10min后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
② 滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時(shí)振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度,一般可用“+"表示:
(-)無(wú)熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見(jiàn);(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標(biāo)本特異性熒光染色強(qiáng)度達(dá)“++"以上,而各種對(duì)照顯示為(±)或(-),即可判定為陽(yáng)性。
Phospho-Smad1/5 (Ser463 + Ser465): 0酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1/5抗體 0.1ml
phospho-Estrogen Receptor beta (Ser87): 0酸化雌激素受體β抗體 0.1ml
孕激素受體抗體 Anti-PR 0.2ml
Anti-Phospho-Syk (Tyr525/526) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化非受體型酪蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MLF1 Interacting Protein/PBIP1(Thr78) 0酸化卡波西氏肉瘤皰疹病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
HCV-Core 丙型肝炎病毒-C區(qū)(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
小鼠信號(hào)素7A(SEMA7A)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,SEMA7A ELISA Kit
兔腎素(Renin)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbieninELISAKit 96T/48T
牛組胺(HIS)免疫試劑盒 Bovine histamine,HIS ELISA kit
英文名稱HumanVIII-AgELISAKit人VIII相關(guān)抗原(VIII-Ag)
蛋白免疫雜交封閉溶液100毫升
RatMethylase酶聯(lián)免疫試劑盒大鼠甲基化酶(Methylase)酶聯(lián)免疫試劑盒
DUX4抗體產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌血清型PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Enterotoxigenic E.coli(ETEC)O139PCR 50T
產(chǎn)氣克雷伯氏菌PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Klebsiella aerogenesPCR 50T
腸出血性大腸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Enterohemorrhagic E. coli(EHEC)PCR 50T
腸道腺病毒型PCR檢測(cè)試劑盒 英文名稱; Enteric Adenovirus41PCR 50T
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。