詳細(xì)介紹
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
中文名稱:化膿放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Actinomyces pyogenes
貨號:GOY-M3632
規(guī)格:50T
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡介
公式:
優(yōu)點(diǎn):分析簡單,實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡單
缺點(diǎn):對每一個基因,每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對定量方法之一
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時,提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng)、錯配率低等優(yōu)點(diǎn)。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增,提高PCR的準(zhǔn)確性。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時,只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴(kuò)增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運(yùn)輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進(jìn)行評估。
4、 實(shí)時熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強(qiáng)度信號,這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
胃癌組織源性原代成纖維細(xì)胞2934-97-6血栓素A2合成酶檢測試劑盒
肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞29741-09-1血栓素A2檢測試劑盒
肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞29741-10-4血栓前體蛋白檢測試劑盒
肺大動脈平滑肌細(xì)胞29782-68-1血清淀粉樣蛋白P檢測試劑盒
肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞29838-67-3血清淀粉樣蛋白A4檢測試劑盒
肺大靜脈平滑肌細(xì)胞298-81-7血清淀粉樣蛋白A3檢測試劑盒
肺動脈成纖維細(xì)胞29883-15-6血清淀粉樣蛋白A檢測試劑盒
肺泡上皮細(xì)胞30045-16-0血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白檢測試劑盒
氣管上皮細(xì)胞30220-46-3血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2檢測試劑盒
支氣管上皮細(xì)胞302-27-2血漿抗凝蛋白S檢測試劑盒
小氣道上皮細(xì)胞303-45-7血漿激肽釋放酶檢測試劑盒
肺成纖維細(xì)胞305-01-1血漿α顆粒膜蛋白檢測試劑盒
支氣管平滑肌細(xì)胞306-08-1血紅素氧合酶2檢測試劑盒MMO-MUG培養(yǎng)基Chemical Phosphorylation Reagent II 猴子循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)ELISA Kit
阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基(DFI瓊脂)3'-DABCYL CPG *500 Å*猴子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA Kit
VRB-MUG瓊脂3'-DABCYL CPG *1000 Å*猴子血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA Kit
EC-MUG培養(yǎng)基5'-DABCYL C6 phosphoramidite 猴子血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA Kit
化膿放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒EC-MUG培養(yǎng)基(100g)3'-Fluorescein CPG *500 Å*猴子性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA Kit
MUG營養(yǎng)瓊脂(NA-MUG培養(yǎng)基)3'-Fluorescein CPG *1000 Å*猴子脫表雄酮(DHEA)ELISA Kit
MUG營養(yǎng)瓊脂6-FAM CPG [3'-(6-Fluorescein) CPG] *500 Å*猴子天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA Kit
腸球菌顯色培養(yǎng)基6-FAM CPG [3'-(6-Fluorescein) CPG] *1000 Å*猴子瘦素(LEP)ELISA Kit
MEI培養(yǎng)基FITC phosphoramidite 猴子腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA Kit
念珠菌顯色培養(yǎng)基6-FAM phosphoramidite [5'-Fluorescein phosphoramidite]猴子神經(jīng)型一氧化氮合成酶(nNOS)ELISA Kit
大腸桿菌/大腸菌群液體顯色培養(yǎng)基6-Fluorescein phosphoramidite 猴子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA Kit
MMO-MUG培養(yǎng)基6-HEX phosphoramidite [5'-Hexachlorofluorescein phosphoramidite] 猴子凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA Kit
MUGal肉湯6-TET phosphoramidite [5'-Tetrachlorofluorescein phosphoramidite] 猴子腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA Kit