詳細介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進行Real Time PCR擴增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時,提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高、特異性擴增能力強、錯配率低等優(yōu)點。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴增,提高PCR的準確性。
中文名稱:馬節(jié)桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Arthrobacter equi
貨號:GOY-M3673
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時,只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細胞:5×106動植物,酵母細胞或細菌細胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
抗眼鏡蛇蛇蛋白抗體57-88-5牛奶過敏原特異性IgE抗體ELISA試劑盒
下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗體20830-75-5牛兒基焦磷酸合酶檢測試劑盒
胰高血糖素樣肽-1抗體21293-29-8凝血因子XIIIB鏈檢測試劑盒
胰高血糖素樣肽-2抗體77-06-5凝血因子XIII A1檢測試劑盒
葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1抗體67-03-8凝血因子VIII檢測試劑盒
葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2抗體83-88-5凝血因子Ⅻ檢測試劑盒
葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3抗體59-30-3凝血因子ⅩⅢ檢測試劑盒
葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4抗體303-98-0凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原檢測試劑盒
風(fēng)疹病糖蛋白抗體145-13-1凝血因子Ⅶ檢測試劑盒
結(jié)腸癌抗原糖蛋白A33抗體58-22-0凝血因子Ⅴ檢測試劑盒
磷脂酰基醇蛋白聚糖-3抗體50-23-7凝血因子Ⅱ檢測試劑盒
糖皮質(zhì)激素受體抗體600-57-7凝血酶原前體蛋白檢測試劑盒
G蛋白偶合受體激酶1抗體57-83-0凝血酶原片段F1+2檢測試劑盒PPLO瓊脂ReadiLink™ KLH Conjugation Kit *For antibody development*大鼠二銨氧化酶(DAO)ELISA Kit
葡萄糖肉湯ReadiLink™ FITC Protein Labeling Kit大鼠兒茶酚抑素(CST)ELISA Kit
液體培養(yǎng)基ReadiLink™ Protein Biotinylation Kit *Powered by Biotin Visionization Technology*大鼠多藥耐藥蛋白1(ABCB1)ELISA Kit
麥芽汁瓊脂ReadiLink™ Protein Thiolation Kit大鼠多肽YY/酪酪肽(PYY)ELISA Kit
Preston肉湯基礎(chǔ)Amplite™ Fluorimetric Maleimide Quantitation Kit *Green Fluorescence*大鼠多巴銨D2受體配體(D2RL)ELISA Kit
YM培養(yǎng)基Amplite™ Fluorimetric Thiol Quantitation Assay Kit *Green Fluorescence*大鼠對氧磷酶1(PON1)ELISA Kit
布氏肉湯添加劑Amplite™ Colorimetric Maleimide Quantitation Kit大鼠蕈堿型酰膽堿受體(M-AChR)ELISA Kit
馬節(jié)桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒WLN培養(yǎng)基ProLite™ Colorimetric Protein Quantitation Kit *5-500 µg/mL Dynamic Range*大鼠頂體蛋白(ACR)ELISA Kit
梭菌屬測定用培養(yǎng)基ProLite™ Fluorimetric Protein Quantitation Kit *10-1000 ng/mL Dynamic Range*大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA Kit
化鈉營養(yǎng)瓊脂Amplite™ Colorimetric Aldehyde Quantitation Kit大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS)ELISA Kit
小肉湯培養(yǎng)基Amplite™ Fluorimetric Fluorescamine Protein Quantitation Kit *Blue Fluorescence*大鼠淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA Kit
硫酸慶大霉素Amplite™ Colorimetric Acetylcholinesterase Assay Kit大鼠抵抗素樣α(Retnla)ELISA Kit
含青霉素酶TSA培養(yǎng)基平板Amplite™ Fluorimetric Acetylcholinesterase Assay Kit *Green Fluorescence*大鼠低密度脂蛋白受體(LDLR)ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標準曲線法簡介
公式:
優(yōu)點:分析簡單,實驗優(yōu)化簡單
缺點:對每一個基因,每一輪實驗都必需做標準曲線;必需有固定的標準品做標準曲線;這些標準品并不代表樣品擴增的真實狀態(tài)應(yīng)用:基因表達調(diào)控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。