Weil髓鞘染色液公司正在出售的產(chǎn)品：FOSL2/FITC 熒光標記兔抗FOSL2抗體IgGD-果糖 分析標準品
FOXJ1/HFH-4/FITC 熒光標記抗插頭蛋白J1抗體IgGD-果糖 Ph. Eur., BP,USP
FOXO1/FOXO1A/FITC 熒光標記叉頭轉(zhuǎn)錄因子O1抗體IgGD-果糖 99%，用于培養(yǎng)
Phospho-FoxO1 (Thr24)/FoxO3a (Thr32)

商品介紹：

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

新穿心蓮內(nèi)酯（標準品）英文名稱： Tenacissoside H粘附分子3抗體（脊髓灰質(zhì)炎病受體相關(guān)蛋白3）包裝5g

新地奧斯明英文名稱： Cucurbitacin E螺旋環(huán)螺旋蛋白2抗體包裝1g

新綠原(標準品)英文名稱： Koumine胚胎發(fā)育相關(guān)蛋白Nodal抗體包裝5g

新芒果苷(標準品)英文名稱： Gelsemine增殖相關(guān)蛋白NANOS1抗體包裝1g

新藤黃(標準品)英文名稱： Procyanidin B1同源盒蛋白NOBOX抗體包裝5g

新烏頭原堿（標準品）英文名稱： Cyasterone轉(zhuǎn)錄因子NAC1抗體包裝100g

杏葉防風（標準品）英文名稱： Tetrahydroberberine,THB神經(jīng)生長因子受體抗體包裝25g

雄蠶蛾（家蠶）（標準品）英文名稱： Tenacissoside I磷化KB抑制蛋白激ε包裝500g

熊膽粉（標準品）英文名稱： Tenacissoside G磷化神經(jīng)纖毛蛋白1抗體包裝1g

熊果苷（標準品）英文名稱： Praeruptorin C1型神經(jīng)纖維瘤抗體包裝250mg

熊果；烏蘇(標準品)英文名稱： Pterostilbene磷化1型神經(jīng)纖維瘤抗體包裝5g

繡線菊（標準品）英文名稱： Pterostilbene中心粒蛋白Nudel抗體包裝100g

溴東莨菪堿（標準品）英文名稱： Rotenone磷化中心粒蛋白Nudel抗體包裝25g

徐長卿（標準品）英文名稱： 7-Epitaxol類固脫氫樣蛋白NSDHL抗體包裝25g

續(xù)斷（川續(xù)斷）（標準品）英文名稱： Solasodine磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體包裝5g

熒光假單胞菌Pseudomonas│fluorescens 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR解整合樣金屬蛋白33試劑盒川芎;Tetramethylpyraz

裂孔平伏菌Poria│versipora (Pers.) Romell 質(zhì)量規(guī)格：>99%解整合樣金屬蛋白19試劑盒茶多酚;Tea polyphenol

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品解整合樣金屬蛋白15試劑盒茶;L-Theanine
Weil髓鞘染色液稻麥穗孢霉 草酸鋅糖化血紅蛋白A1cElisa

無花果曲霉 L-2-溴苯氨酸糖化血清蛋白Elisa

芹側(cè)耳（杏鮑菇） 1-(3-氟-4-基)乙酮糖皮質(zhì)Elisa

傳染性法氏囊病病 3--4--1-磺酰糖皮質(zhì)類固受體Elisa

金太陽杏葉細性穿孔病 4--3-甲糖原合成Elisa

青灰紅菇 N-4-苯甘氨酸糖原合成激Elisa

金黃殼囊孢 3-甲基嗎啉糖原磷酸化Elisa

大腸埃希氏 3-肼基吡啶天門冬氨酸Elisa

木糖葡萄球 5-氨基-2-甲酯谷草轉(zhuǎn)氨;天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa

木霉 2-嗎啉基鐵蛋白Elisa

構(gòu)巢曲霉 4-叔丁基芐鐵調(diào)Elisa

孢小克銀漢霉輪生變種 2-甲酸甲酯同型半胱氨酸Elisa

墳墓節(jié)桿 4-氧代酮鹽酸鹽銅鋅超氧化物歧化1Elisa

賴氨酸芽孢桿 5-硝基-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽酮體Elisa

三葉草根瘤 4-(9H-咔唑-9-基)苯酸透明帶結(jié)合蛋白3Elisa