以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
改良Masson三色染色液 |
| 8×50ml | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
用途: 膠原纖維染色,可區(qū)分膠原纖維和肌纖維,。也稱(chēng)麗春紅酸性品紅-藍(lán)法。 注意事項(xiàng): 染核后能更容易區(qū)分膠原纖維和肌纖維,采用天青石藍(lán)蘇木素染核等改良配方。膠原纖維呈藍(lán)色,肌纖維、胞質(zhì)、紅細(xì)胞、纖維素、角蛋白呈紅色,胞核呈藍(lán)褐色。 儲(chǔ)存條件:4℃,避光,12個(gè)月 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
酰新烏頭原堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Regorafenib(BAY 73-4506)內(nèi)皮凝集HL1抗體包裝1g
酰氧化芍藥苷英文名稱(chēng): Ostarine,GTx-024干擾α抗體包裝250mg
比枯枯靈,右旋荷包牡丹堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): XTT sodium salt白介-17F抗體包裝1g
蓽茇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): (2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone白介6抗體(N端)包裝5g
蓽澄茄(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): (2,6,6-Trimethyl-2-hydroxycyclohexylidene)acetic acid lactone白介6抗體包裝1g
蓖麻子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Macitentan干擾epsilon 1蛋白抗體包裝25g
蝙蝠葛堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): M344磷化KB抑制蛋白激γ抗體包裝5g
蝙蝠葛諾林堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 2-Nitroimidazole磷化白介1受體1抗體包裝25g
蝙蝠葛蘇林堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 4-(Trifluoromethyl)-1H-imidazole白介3抗體包裝5g
扁柏雙黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 2-Methyl-4-trifluoromethylimidazole異戊烯焦磷1抗體包裝1g
扁桃苷/苦杏仁苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 2-Aminoimidazole hemisulfate磷化胰島受體底物-1抗體包裝25g
扁蓄苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Odanacatib;MK0822磷化胰島受體底物-1抗體包裝5g
表白樺脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 4-NITROCATECHOL胰島誘導(dǎo)基因1抗體包裝1mg
表兒茶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 4-NITROCATECHOLFC段γ受體3/免疫球蛋白G Fc段受體III抗體包裝1g
表兒茶沒(méi)食子酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Troglitazone(CS-045)磷化白介-1受體相關(guān)激4抗體包裝25g
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格:純度≥98%蘭尼堿抗體槲皮-3-O-β-D-葡糖糖-7-O-
地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,進(jìn)口原裝賴酰氧化琥珀;Butane diacid
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP33,BR,可用于培養(yǎng)賴特異性脫基5A試劑盒胡薄荷;Menthone
改良Masson三色染色液熒光假單胞 1-(tert-butoxycarbonyl)-2-(4-fluorobenzyl)-D-proli脂肪酸去飽和2Elisa
基利恩帚枝霉 色霉A3L-谷氨酸Elisa
異常威克漢姆酵母 二苯亞甲基氨基乙奎寧酸肉桂酸羥基化轉(zhuǎn)移Elisa
金針菇F8909 3-氯-4-氟還原型Elisa
枯草芽孢桿 3,5-二甲氧基苯甲脫羧Elisa
犁頭霉屬 2,4-二芐氧基嘧啶-5-酸淀粉脫支Elisa
枯草芽孢桿 2-羥基-5-甲氧基苯乙酮半胱氨酸蛋白Elisa
黑曲霉 (R)-2-氨基己烷a_1,4葡聚糖轉(zhuǎn)移Elisa
賴氨酸芽胞桿屬 BOC-D-環(huán)己基甘氨酸色氧化Elisa
棉盤(pán)孢 4-苯甲氧基-3-甲羥甲基戊二酸單酰還原Elisa
蘋(píng)果黑腐皮殼 甘氨酸-L-脯氨酸ATPElisa
米曲霉 D-半胱氨酸甲酯鹽酸鹽ADP-焦磷酸化Elisa
擴(kuò)展青霉 5-氯-2-甲氧基苯甲蔗糖Elisa
金灰青霉 2,2-二甲基-N-(3-吡啶基)酰果糖Elisa
裂褐層孔 2,2,5,5-Tetramethyl-3-pyrrolidinecarboxamide黃烷酮3-羥化Elisa