熒光定量PCR試劑盒：
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng)，能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時(shí)，提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類產(chǎn)品的3-5倍，能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動(dòng)Foregene Taq DNAPolymerase，該酶相對(duì)于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng)、錯(cuò)配率低等優(yōu)點(diǎn)。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增，提高PCR的準(zhǔn)確性。

中文名稱：馬虻探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Gasterophilus spp.
貨號(hào)：GOY-M4041
規(guī)格：50T
產(chǎn)品特性： 高特異性：本產(chǎn)品采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶，90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性，可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度：本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測(cè)低拷貝數(shù)的模板，且重復(fù)性好。 高適用性：本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。

試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR：包括特別改造的熱啟動(dòng) Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時(shí)，只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye：一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上，用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同，用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O：超純水，用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴(kuò)增。
樣品要求及注意事項(xiàng)：
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料，實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮，請(qǐng)您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑，并用干冰運(yùn)輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ，也可以將樣品研磨后放在 Trigol中，動(dòng)植物組織 ： 50～100mg/mlTrigol，貼壁細(xì)胞：10cm2/mlTrigol，懸浮細(xì)胞：5×106動(dòng)植物，酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對(duì)您提供的材料進(jìn)行評(píng)估。
4、 實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。
熒光定量PCR原理：
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

白蠟樹精Chaetomium elatum Kunze et Schmidt : Fries, ..白介素31(IL31)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

表木栓醇Marasmius pulcherripes Peck基質(zhì)金屬蛋白酶23B(MMP23B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

附子靈Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..基質(zhì)金屬蛋白酶23B(MMP23B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

酸加蘭他敏Homo sapiens, human攝食抑制因子1(NES1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

加蘭他敏Kluyvera intermedia (Izard et al. 1980) Pav ..α1-微球蛋白(α1M)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

沒食子酸Neosartorya spathulata Takada et Udagawa干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

3,4,5-三氧基苯酸Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

日蟾它靈Hydropisphaera erubescens (Desmazieres) Ros ..干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

藤黃酸（鑒別用）Mus musculus (B cell); Mus musculus (myeloma ..干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

靈芝酸 A（96%）Mus musculus, mouse liver干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

馬虻探針法熒光定量PCR試劑盒靈芝酸 BHomo sapiens, human干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

天麻素Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

冬綠苷Mus musculus, mouse轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子 對(duì)氨基苯酸酯

EC 3.4.21.14Rabbit ALDOC (Aldolase C, Fructose Bisphosphate) ELISA Kit

兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶 柳匍匐次苷

LaurocapramRabbit TP/TXA2R (Thromboxane Receptor) ELISA Kit

蘇云金芽孢桿菌蛋白 Rutaretin

Azaserine;Serine diazo acetate esterRabbit SHBG (Sex Hormone Binding Globulin) ELISA Kit

大鼠肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶 葉含酰癭花香茶菜素 B

PERYLENE-D12Rabbit C4BP (C4 Binding Protein) ELISA Kit

兔子補(bǔ)體片斷3a 連翹酸

BENZENE-D6Rabbit M-AChR M3 (Muscarinic Acetylcholine Receptor M3) ELISA Kit

小鼠溶菌酶 槲皮素3-O-洋槐糖苷

BENZO(A)ANTHRACENE D12Rabbit PRELP (Proline Arginine Rich End Leucine Rich Repeat Protein) ELISA Kit

相對(duì)定量簡介：
分析方法： ①雙標(biāo)曲法 ②2 － △Ct ③2 － △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡介
公式：
優(yōu)點(diǎn)：分析簡單，實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡單產(chǎn)品僅用于科研
缺點(diǎn)：對(duì)每一個(gè)基因，每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線；必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線；這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用：基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對(duì)定量方法之一。