熒光定量PCR試劑盒：
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng)，能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時(shí)，提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類產(chǎn)品的3-5倍，能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動(dòng)Foregene Taq DNAPolymerase，該酶相對(duì)于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng)、錯(cuò)配率低等優(yōu)點(diǎn)。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增，提高PCR的準(zhǔn)確性。

中文名稱：新兇手弗朗西斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Francisella novicida
貨號(hào)：GOY-M4021
規(guī)格：50T
產(chǎn)品特性： 高特異性：本產(chǎn)品采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶，90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性，可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度：本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測(cè)低拷貝數(shù)的模板，且重復(fù)性好。 高適用性：本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。

試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR：包括特別改造的熱啟動(dòng) Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時(shí)，只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye：一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上，用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同，用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O：超純水，用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴(kuò)增。
樣品要求及注意事項(xiàng)：
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料，實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮，請(qǐng)您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑，并用干冰運(yùn)輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ，也可以將樣品研磨后放在 Trigol中，動(dòng)植物組織 ： 50～100mg/mlTrigol，貼壁細(xì)胞：10cm2/mlTrigol，懸浮細(xì)胞：5×106動(dòng)植物，酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對(duì)您提供的材料進(jìn)行評(píng)估。
4、 實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。
熒光定量PCR原理：
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

蒼術(shù)苷Afrozen纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

桃葉珊瑚苷Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..骨鈣素(OC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

橙黃決明素Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..補(bǔ)體成分5(C5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

扁蓄苷frozenS100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

阿奇霉素Dictyostelium purpureum Olive轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

黃芩素Aspergillus flavus Link凝血因子ⅩⅢB肽(F13B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

黃芩苷Sordaria macrospora Auerswald腦鈉素(BNP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

補(bǔ)骨脂酚Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..三磷酸肌醇(IP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

寶藿苷ⅠMucilaginibacter paludisI/腫瘤壞死因子β(TNFβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

蘆薈苷Homo sapiens, human免疫球蛋白A(IgA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

補(bǔ)骨脂二黃酮醚 Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hanse ..磷新兇手弗朗西斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒脂酰肌醇特異性磷酯酶Cβ1(PLCβ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

貝萼皂苷元Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..二?；视?DAG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

龍膽山酮酚Corynebacterium pseudodiphtheriticum Lehman ..白介素18(IL18)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)兔可溶性凋亡相關(guān)因子 Trichokaurin

Deoxythymidine triphosphateRabbit Anti-Surv (Anti-Survivin Antibody) ELISA Kit  

人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子 Tetrahydrolachnophyllum lactone

Cytidylic acidRabbit GPI (Glycophosphatidylinositol) ELISA Kit

兔6酮前列腺素F1a Tetrachyrin

NARabbit CD99 (Cluster of Differentiation 99) ELISA Kit

小鼠肌鈣蛋白T 繡線菊堿 F

CI 42755Rabbit PMN Elastase (Polymorphonuclear Elastase) ELISA Kit

大鼠吡啶酚 Spegatrine

Benzotriazol-1-yloxytris(dimethylamino)-phosphonium hexafluorophosphateRabbit HO1 (Heme Oxygenase 1) ELISA Kit

麥胚凝集素/凝集蛋白 Sequosempervirin B

NARabbit TAT (Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit

相對(duì)定量簡(jiǎn)介：
分析方法： ①雙標(biāo)曲法 ②2 － △Ct ③2 － △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡(jiǎn)介
公式：
優(yōu)點(diǎn)：分析簡(jiǎn)單，實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡(jiǎn)單產(chǎn)品僅用于科研
缺點(diǎn)：對(duì)每一個(gè)基因，每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線；必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線；這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用：基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對(duì)定量方法之一。