詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時,提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴增效率高、特異性擴增能力強、錯配率低等優(yōu)點。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴增,提高PCR的準(zhǔn)確性。
中文名稱:人乳頭瘤病毒6探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Human Papillomavirus 6 (HPV-6)
貨號:GOY-M4126
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時,只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進(jìn)行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴增基因的詳細(xì)信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
Rosiglitazone Maleate(標(biāo)準(zhǔn)品)Phycomyces blakesleeanus Burgeff, teleomorph解整合素金屬蛋白酶12(ADAM12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Rosiglitazone(標(biāo)準(zhǔn)品)Onychocola canadensis Sigler趨化因子C-X3-C-基元受體1(CX3CR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Sitagliptin phosphate monoh...Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..107kDa肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型(INPP4A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Sivelestat sodium (標(biāo)準(zhǔn)品)Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..107kDa肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型(INPP4A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Sorafenib tosylate(標(biāo)準(zhǔn)品)Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..層粘連蛋白β3(LAMβ3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Stanozolol(標(biāo)準(zhǔn)品)Monascus kaoliang Iizuka et Minaki融合蛋白(FUS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Tamoxifen Citrate (標(biāo)準(zhǔn)品)Homo sapiens, human黑素轉(zhuǎn)鐵蛋白(MFI2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Tetrabenazine(標(biāo)準(zhǔn)品)Helicobacter sp.視神經(jīng)病變誘導(dǎo)反應(yīng)蛋白(OPTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Toremifene Citrate(標(biāo)準(zhǔn)品)freeze-dried8-羥基鳥嘌呤糖苷酶1(OGG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
人乳頭瘤病毒6探針法熒光定量PCR試劑盒Triamcinolone Acetonide(標(biāo)準(zhǔn)品...Oidiodendron griseum Robak尿嘧啶DNA糖基化酶(UNG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Vildagliptin(標(biāo)準(zhǔn)品)Aspergillus flavus Link胸苷嘧啶DNA糖基化酶(TDG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
α-苯甘氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Rhynchosporium secalis (Oudemans) Davis, an ..單鏈選擇性單功能尿嘧啶DNA糖基化酶1(SMUG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
α-對羥基苯甘氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Arthrobacter histidinolovorans Ada-基嘌呤DNA糖基化酶(MPG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)大鼠淋巴細(xì)胞趨化因子 碳酸鉀
ALKALI BLUE 6BRabbit SBEM (Small Breast Epithelial Mucin) ELISA Kit
小鼠磷酸肌醇3激酶 硫酸鉻鉀
EC 3.1.3.1Rabbit I-TAC (Interferon Inducible T-cell Alpha Chemoattractant) ELISA Kit
人粘蛋白/粘液素5B 碘化鉍鉀
NARabbit CALLA (Common Acute Lymphocytic Leukaemia Antigen) ELISA Kit
人腸三葉因子 硫氰酸鉀
PHENYLMERCURIC NITRATERabbit FGFBP1 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 1) ELISA Kit
小鼠β內(nèi)肽 硫酸鉀
Janus Green BRabbit GPC2 (Glypican 2) ELISA Kit
大鼠末端補體復(fù)合物C5b-9 酒石酸鉀
Potassium pyrophosphateRabbit CLEC2C (C-Type Lectin Domain Family 2 Member C) ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡介
公式:
優(yōu)點:分析簡單,實驗優(yōu)化簡單產(chǎn)品僅用于科研
缺點:對每一個基因,每一輪實驗都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴增的真實狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。